Hoechst-细胞调亡

细胞凋亡是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用；它并不是病理条件下，自体损伤的一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。细胞发生凋亡时，就像树叶或花的自然凋落一样，对于这种生物学观察，借用希腊“Apoptosis”来表示，意思是像树叶或花的自然凋落，可译为细胞凋亡。

其实从严格的词学意义上来说，细胞程序性死亡与细胞凋亡是有很大区别的。细胞程序性死亡的概念是1956年提出的，PCD是个功能性概念，描述在一个多细胞生物体中某些细胞死亡是个体发育中的一个预定的，并受到严格程序控制的正常组成部分。例如蝌蚪变成青蛙，其变态过程中尾部的消失伴随大量细胞死亡，高等哺乳类动物指间蹼的消失、颚融合、视网膜发育以及免疫系统的正常发育都必须有细胞死亡的参与。这些形形色色的在机体发育过程中出现的细胞死亡有一个共同特征：即散在的、逐个地从正常组织中死亡和消失，机体无炎症反应，而且对整个机体的发育是有利和必须的。因此认为动物发育过程中存在的细胞程序性死亡是一个发育学概念，而细胞凋亡则是一个形态学的概念，描述一件有着一整套形态学特征的与坏死完全不同的细胞死亡形式。但是一般认为凋亡和程序性死亡两个概念可以交互使用，具有同等意义。

虽然凋亡与坏死的最终结果极为相似，但它们的过程与表现却有很大差别。坏死是细胞受到强烈理化或生物因素作用引起细胞无序变化的死亡过程。表现为细胞 胀大，胞膜破裂，细胞内容物外溢，核变化较慢，DNA降解不充分，引起局部严重的炎症反应。凋亡是细胞对环境的生理性病理性刺激信号，环境条件的变化或缓和性损伤产生的应答有序变化的死亡过程。其细胞及组织的变化与坏死有明显的不同。

那么问题来了，为什么有Hoechst呢？那先来了解一下。

Hoechst（B8030-Jinpanbio）是一类DNA染料。读音hoaxt(类似于‘赫克斯特’)，最初由?HoechstAG公司发明。这是一家德国公司，创建于1863年，后来经过数次合并，变成了Sanofi-Aventis（赛诺菲）集团的子公司。Hoechst与DNA双链中的小沟（minor groove）结合，更倾向与于富含A/T（腺嘌呤/胸腺嘧啶）的DNA链。虽然说它能与所有的核酸结合，但是富含AT的双链DNA使荧光强度显著增强。Hoechst可穿过细胞膜，可结合于活细胞或固定过的细胞。因此可用于活细胞标记。

因为hoechst能够染活细胞，所以在一般性的细胞凋亡实验中，基本所有的细胞都能染色，只是染色的深浅不一，活细胞呈现正常均匀的蓝色，而凋亡细胞因为细胞核发生了皱缩变成了致密浓染，会有点发白。所以hoechst与细胞凋亡就有联系了。