抗体洗脱液的正确选择-技术文章

抗体洗脱液的正确选择

现在市场上的抗体洗脱液和网上的洗脱液配方都是非常多的,那么选择什么样的洗脱液是有意义的呢?或者说将洗脱液带来的不稳定性降到最低,那这里我先给讲讲我的浅见吧。

洗膜有的是强酸性,有的不是强酸性的,那么那个才是只是洗脱抗体,不洗脱蛋白的呢?

有的同学担心,在洗膜的同时,我的蛋白也被洗掉了,本来丰度就非常低的蛋白,被这么强酸性液体洗涤30分钟之后,膜上的检测数据还准吗?

以上的担心是对的,所以我的建议就是如果这个蛋白不好测,那么请你在第一次就检测这个蛋白,避免抗体洗脱液带来的怀疑,如果两个都是,那么最好建议你不要使用抗体洗脱液了,两个都新做吧。这样的最好了,但是如果样品非常珍贵,没有重复,那么请你每次测完目的蛋白后都要检测一次内参,这样做一个数据上的处理,基本就能解决问题了。

那么问题又来了,这篇文章讲正确选择,从上面的说的都是跟这个无关呀,从上看什么样的都行呀,没有区别呀!

呵呵哒……区别还有的,上面的实验误差就是我们的正确选择,把实验误差降低就是正确选择,如果对抗体洗脱液不做选择,有可能你的实验误差是选择人的几倍或者几十倍,谁让免疫印迹实验这么灵敏呢!所以在你需要用到stripping buffer的时候,建议你先敷两次内参抗体,看看前后的差距,如果数据统计,前后的差距在5%之内,那么这个stripping buffer可以用了,如果超过5%,那么建议还是不要用的好(非用不可这个除外)。

所以大家明白了吗?stripping buffer 不仅仅是带来方便,同样也带来了不确定性,所以如何正确的选择抗体洗脱液就成了你们需要考虑的问题。

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