BSA封闭液原理及注意事项-技术文章

BSA封闭液原理及注意事项

    5%BSA封闭液(Blocking Buffer)适用于 Western Blotting、ELISA 以及免疫组化实验中非特异性蛋白结合位点的封闭。

BSA封闭液原理:

    封闭的目的是防止免疫试剂的非特异性吸附。封闭一般采用异源性蛋白质或去污剂,常用的有0.2%Tween-20,5%BSA,10%马血清以及5% No-fat milk等,至于选择哪一类封闭液,首先应考虑与检测试剂相适应,如采用葡萄球菌蛋白A(SPA)作用检测试剂,就不能用全血清封闭,其次是尽可能使非特异着色背景浅,封闭液以5%BSA效果较好。

BSA封闭液使用方法:

    本产品为即用型,无需稀释。封闭步骤中加入足够量的 BSA 封闭液充分覆盖载体表面,振荡封闭,封闭 时间依据实验而定,一般室温封闭半小时至 1 小时,然后进行抗体孵育等后续操作。

BSA封闭液注意事项:

    通常在室温封闭 60 分钟即可。对于一些背景非常高的抗体,可以 4℃封闭过夜。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    使用5%BSA 封闭液封闭后,可以减小后续的一抗或二抗等和载体的非特异性结合,降低背景,增强信噪比,以达 到理想的显色效果。

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