油红O染色步骤有哪些-技术文章

油红O染色步骤有哪些

油红O染色液主要由油红O异丙醇饱和液组成,利用染料易溶于脂质的性质证明组织脂质含量的多少。适用于细胞学与组织学研究的切片观察.但渗透慢,不能长期保存;冰冻切片附贴于载玻片后,立即放入恒冷箱中的固定液固定1分钟后即可染色。染色后脂滴呈橘红色。下面来了解一下油红O染色步骤有哪些。
油红O染色步骤
试剂:
0.5%的油红O溶液
配方(100ml): 油 红O : 1.5g
70%乙醇 : 50ml
丙酮 : 50ml
需要的其他试剂:异丙醇、乙醇、丙酮、苏木素(hematoxylin)
油红O染色步骤:
1.将冰冻切片(厚度为4-8um)常温干燥15-20min.
2.100%异丙醇孵育5分钟(避免把水带入油红O)。
3.0.5%的油红O溶液孵育7-8分钟(在60 oC烤箱)
4.85%异丙醇溶液洗3分钟
5.双脱水洗。
6.苏木素染1-1.5min。
7.双脱水洗。
8.封片剂封片
结果: 脂质呈红色或者橘黄色
细胞核呈淡蓝色
油红O染色步骤注意事项:
1 由于脂肪易溶于有机溶剂,所以一般用冰冻切片染色来显示。
2 作脂肪染色的冰冻切片不能太薄,过薄的切片常会使脂质丢失。
3 苏木素复染时间不能过长。
4 染色结果不能长期保存,应尽快观察。

以上便是油红O染色步骤,油红O染色常用作染脂肪。脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等。脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。脂类染色,用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油明胶和阿拉伯糖胶等。

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