瑞氏染色原理及作用

    瑞氏染液由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料，溶于甲醇 ，后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。瑞氏染色法就是用瑞氏染色液对细菌进行染色。那么瑞氏染色原理是什么？

    瑞氏染色原理：

    瑞氏染料是由碱性染料美蓝（ Methvlem blue ）和酸性染料黄色伊红（ Eostm Y ）合称伊红美蓝 染料即瑞氏 （美蓝－伊红Y）染料。伊红钠盐的有色部分为阴离子，无色部分为阳离子，其有色部分为酸性，故称伊红为酸性染料。美蓝通常为氯盐是碱性的，美蓝的中间产物结晶为三氯化镁复盐，其有色部分为阳离子，无色部分为阴离子，恰与伊红钠盐相反。

    为了观察细胞内部结构，识别各种细胞及其异常变化，血涂片必须进行染色。瑞氏染色法是血细胞分析最经典和最常用的染色法。 细胞的各大种成分均由蛋白质构成，由于蛋白质是两性电解质，所带正电荷的数量随溶液pH而定。对某一蛋白质而言，如环境pH<pI，（pI为蛋白质的等电点），则该蛋白质在酸性环境中正电荷增多，易与伊红结合，染色偏红；相反，当环境的pH>pI，即在碱性环境中负电荷增多，易与美蓝结合，染色偏蓝。临床上常用缓冲液（pH6.4～6.8）来调节染色时的pH值，同时还应注意使用清洁、中性的玻片，优质的甲醇配制染液，以期达到满意的染色效果。

    瑞氏染色的染料配方浓度对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识别较佳,但对胞浆着色偏酸,色泽偏红,对细胞浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差。

    瑞氏染液染色鉴定

    瑞氏或姬姆萨染色液鉴定：刚配好或放置一个月以上的染液可进行下列鉴定：

    1．取1滴染液于乳白玻板上，自行迅速扩散开，其颜色变紫红色，且有伪足形成。

    2．取1滴染液加1滴缓冲液，染液由深蓝色立即变为紫红色。

    3．取血片或骨髓片进行试染检查，观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着色情况，pH是否合适及染色合适时间。如有上述变化，表明染液合格，可供使用。

    以上为瑞氏染色原理，瑞氏染色是目前最常用而又最简单的染色方法。瑞氏试剂中之酸性伊红和碱性美蓝混合经化学作用后，变成中性之 伊红化美蓝，久置后，经氧化而含有天青。此三种染料分别和细胞核及浆中的NH3+和COO-等结合，使细胞核及胞浆着色。由于系中性染料，又有缓冲液调节酸碱度，所以细胞受染后，蓝红等颜色都较适中，核染质、胞浆及其中之颗粒显色较为清楚。