简要介绍瑞氏染色的步骤

    瑞氏染色是目前最常用而又最简单的染色方法。瑞氏染液由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料，溶于甲醇 ，后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。瑞氏染色的步骤是什么？为了观察细胞内部结构，识别各种细胞及异常变化，血涂片必须进行染色。血涂片的各种染色方法大多是罗氏染色法衍变而来。目前常用瑞氏染色法。

    瑞氏染色的步骤

    瑞氏染液的配制：取瑞氏染料1.0g、甲醇600ml、甘油15ml。

    I液：将全部染料放入清洁干燥的乳钵中，先加少量甲醇慢慢地研磨(至少半小时)，以使染料充分溶解，再加一些甲醇混匀，然后将溶解的部分倒入洁净的棕色瓶内，乳钵内剩余的未溶解的染料，再加入少许甲醇细研，如此多次研磨，直至染料全部溶解，甲醇用完为止。再加15ml甘油，密闭保存。

    说明：新鲜配制的染液偏碱，染色效果较差，经在室温下贮存一定时间，美蓝逐渐转变为天青B后方可使用，这一过程称染料成熟。放置时间愈久，天青愈多，染色效果也就越好。但必须盖严瓶口，以免甲醇挥发或氧化成甲酸。染液中也可加中性甘油3ml，防止甲醇挥发或氧化，同时也可使血细胞染色较清晰，但我们所用的甲醇必须纯净。

    II液：又称磷酸盐缓冲液(PH6.4-6.8)，包含磷酸二氢钾0.3g，磷酸二氢钠0.2g、蒸馏水加至1000ml。配好后用磷酸盐溶液校正PH，如无缓冲液可用新鲜蒸馏水代替。也可用蒸馏水代替。

    染色：

    ①血涂片自然干燥后，用蜡笔在两端画线，以防染色时染液外溢。随后将玻片平置于染色架上，滴加染液3-5滴，使其盖满血涂片，大约1分钟后，滴加等量或稍多的II液，用吸耳球轻轻混匀。

    ②冲洗：染色5-10分钟用流水染液，待干。

    ③结果观察，将干燥后的血涂片置显微镜下观察。先用低倍镜观察血涂片，再用油镜。

    瑞氏染色法就是用瑞氏染色液对细菌进行染色。瑞氏染色的步骤中需要注意的是冲洗时应以流水冲洗，不能先倒掉染液，以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久，以防脱色。如血涂片上有染料颗粒沉积，可滴加甲醇，然后立即用流水冲洗。