几种磷酸缓冲液的配制方法介绍

磷酸缓冲液也叫做磷酸盐缓冲液，英文名为Phosphate Buffer，是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液，磷酸缓冲液的配制我们一起来了解一下。首先，按照下表所给定的体积，混合1 mol/L 的磷酸二氢钠(单碱)和1mol/L 磷酸氢二钠(双碱)贮液，获得所需pH的磷酸缓冲液。
配制1 mol/L 的磷酸二氢钠(NaH2PO4?H2O)贮液：溶解138g于足量水中，使终体积为1L;1mol/L 磷酸氢二钠(Na2HPO4)贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。
1mol/L 磷酸二氢钠(ml) lmol/L 磷酸氢二钠(ml) 最终pH值
877 133 6.0
850 150 6.1
815 185 6.2
775 225 6.3
735 265 6.4
685 315 6.5
625 375 6.6
565 435 6.7
510 490 6.8
450 550 6.9
390 610 7.0
330 670 7.1
280 720 7.2
0.1mol/L是在1L水中含有的磷酸盐物质的总摩尔。 用磷酸氢二钠和磷酸二氢钠做缓冲液其浓度为： 磷酸氢二钠20.7472g/L; 磷酸二氢钠3.1167g/L。即若配制100mL，则在100ml水中加入2.0747g磷酸氢二钠和0.3117g磷酸二氢钠。
通常使用的磷酸钠缓冲液有磷酸钠缓冲液(NaH2PO4&Na2HPO4)和磷酸钾缓冲液 (K2HPO4&KH2PO4)，由于它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广。那么，各种PH值的磷酸盐缓冲液如何配置?
各种PH值的磷酸盐缓冲液的配制
磷酸盐缓冲液
取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.0)
甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.5)
取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液(pH5.0)
取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。
磷酸盐缓冲液(pH5.8)
取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.5)
取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.6)
取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。
磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)
取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8;另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.8)
取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.0)
取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.2)
取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.3)
取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH值至7.3，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.4)
取磷酸二氢钾1.36g， 加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.6)
取磷酸二氢钾27.22g，加水使溶解成1000ml，取50ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml，再加水稀释至200ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.8)
甲液：取磷酸氢二钠35.9g，加水溶解，并稀释至500ml。
乙液：取磷酸二氢钠2.76g，加水溶解，并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.8～8.0)
取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。
上文就是对磷酸缓冲液的配制的介绍，磷酸缓冲液易配制各种浓度的缓冲液，而且适用的pH值范围宽，可配置各种pH值的缓冲液，同时pH受温度影响较小，还具有较强的缓冲能力缓冲液被稀释后pH变化小。