苏木素染液的配制方法
苏木素是从原产中南美的洋苏木(Haematoxylon campechianum L.)的心材提取出来的浅黄褐色的结晶。苏木素染色液是一种碱性染料,和伊红在组织学上被经常使用,与碘液不同,这是一种永久染色剂。以下是苏木素染液的配制方法,仅供参考。
苏木素染液的配制方法
1) Harry`s苏木素苏木素 1g
无水酒精 10ml
硫酸铝钾 20g 蒸馏水 200ml 氧化汞 0.5g 冰醋酸 8ml
分别用无水酒精溶解苏木素,蒸馏水加热溶解硫酸铝钾,然后两液混合并煮沸,加入氧化汞,继续加热和搅拌至溶液为深紫色,立即冷却,恢复至室温后过滤备用。
(2)改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g 无水酒精 20ml 硫酸铝钾 5g 蒸馏水 330ml 碘酸钠 250mg 甘油 150ml 冰醋酸 10ml
分别用无水酒精溶解苏木素,蒸馏水溶解硫酸铝钾,然后两液混合后,依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。
(3)Mayer`s苏木素苏木素 100mg 蒸馏水 100ml 碘酸钠 20mg 硫酸铝铵 5g 柠檬酸 100ml 水合氯醛 5g
用蒸馏水溶解苏木素后,依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛,过滤后备
(4)Ehrlich氏苏木素(1886)
苏木素 1g
无水酒精 50ml
甘油 50ml
硫酸铝钾 7.5g
蒸馏水 50ml
冰醋酸 5ml
将苏木素溶于无水酒精里,硫酸铝钾溶于蒸馏水中,然后所有的试剂都加在一起,充分搅拌均匀后,放于窗台上阳光充足的地,让其慢慢氧化成熟,大约需四个星期,才可使用。该液量种很好的细胞核染色液,用它染后,细胞核染色清晰,不易过染。对于用酸脱钙组织细胞核的染色,该试剂优于其它各种苏木素。这种自然氧化成熟的苏木素,可长期使用,不会变质。但染色时间较长,需要20分钟以上。
如需急用而苏木素又未成熟时,该液可加入20-30mg的碘酸钠,以促使其迅速氧化成熟,但这试剂配成后,就不是原来的苏木素,不能长期使用,但起码可用半年左右。
(5)Weigert氏铁苏木素
A液: 苏木素 1g
无水酒精 100ml
将苏木素溶于酒精,让其慢慢氧化成熟,约四周以后,便可以使用,或者用成熟的10%的苏木素酒精配制,即时可用。
B液: 29%三氯化铁水溶液 4ml
蒸馏水 95ml
盐酸 1ml
临用时,取A液和B液等份混合,即可使用,在4小时内使用完毕,如果超时,这种试剂便过分氧化而失效。因此,每次使用,需要多少配制多少,采取一次性用完,以免造成浪费。该染液具有抗弱酸的能力,因此,常用于某些特殊染色核的染色,染色时间为20-30分钟。
以上是几种苏木素染液的配制方法。苏木素染色液是组织化学和免疫组织化学中最常用的染料之一,可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色。