低熔点琼脂糖的原理、制备及标准-技术文章

低熔点琼脂糖的原理、制备及标准

低熔点琼脂糖是经过化学修饰的琼脂糖,具有更高的筛过特性,更透明。是理想的DNA和RNA电泳产品,也适合组织培养细胞的克隆和病毒空斑分析。多糖链上引入羟乙基、甲氧基等基团后的琼脂糖。由于其能在30℃左右成胶,约65℃熔化,熔化温度低于大多数双链DNA熔点。利用低熔点琼脂糖的这种性质可以从凝胶中回收天然形式的DNA。
SeaPlaque 琼脂糖—低熔点温度琼脂糖的世界标准
属分子生物学级别,是一种低熔点琼脂糖,所制凝胶具有更高的筛过特性,更透明。是理想的DNA和RNA电泳产品,也适合组织培养细胞的克隆和病毒空斑分析。
⊙应用:DNA和RNA电泳 、病毒空斑检测、细胞培养细胞的克隆。
琼脂糖凝胶制备
用1×TBE溶液配制1%浓度琼脂糖凝胶
1.用于制备胶液的锥形瓶体积应为胶液体积的2-4倍,缓慢向缓冲液中加入琼脂糖,边加边搅拌,防止琼脂糖聚集。记录瓶体和溶液总重量。
2.微波炉高火加热30s,根据配制的溶液体积调整加热时间。加热时间与微波炉、瓶体大小和琼脂糖浓度有关。
3.摇匀琼脂糖溶液。
4.再次高火加热30s,摇匀琼脂糖溶液。
5.将溶液再次放回微波炉,高火加热至沸腾(大约10-35s)。接触移动时琼脂糖胶液可能会剧烈沸腾,小心操作,避免烫伤。从微波炉拿出后,室温冷却1-2min,轻轻摇晃使液体里的气泡溢出。
6.重新放回微波炉,高火加热,使之沸腾约15s,观察琼脂糖的溶解状态,如果仍有颗粒存在,重复该步骤直至所有晶体全部溶解。
7.待琼脂糖完全溶解成液体,重新称量总重量,计算蒸发液体量,用水补齐至原始重量,摇匀液体。
8.建议胶液冷却至50-55℃时灌胶,有利于凝胶孔径均匀一致,不至于损伤制胶仪。灌胶前轻轻摇晃琼脂糖溶液,释放胶液中残存的气泡。
9.向制胶槽中灌胶,一般胶的厚度3-5mm,灌胶后尽量排除梳孔之间或底部的气泡。
10.在室温放置(30-45min)使胶充分凝结。
上海金畔生物科技有限公司为生化试剂供应商,专业生产销售生化试剂、生物试剂、细胞培养、试剂盒、实验耗材等产品。低熔点琼脂糖为上海金畔生物科技有限公司自产产品,其货号为A8350。低熔点琼脂糖常用作DNA、脂蛋白和免疫电泳用;由于其低熔点的特性特别适用于DNA等回收。

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