台盼蓝染色实验步骤说明
台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。台盼蓝染色法常用与加测细胞是否存货。
台盼蓝染色原理:
细胞损伤或死亡时,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA 结合,使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以鉴别死细胞与活细胞。
台盼蓝染色法用品:
1. 4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。
2. 吸管、血细胞计数板、显微镜
台盼蓝染色法步骤:
1、制备单细胞悬液。并作适当稀释(106 细胞/ml)
2、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
3、计数:在三分钟内,用计数板分别计数活细胞和死细胞
台盼蓝染色法结果统计:
镜下观察,死细胞被染成淡蓝色,而活细胞拒染。
根据下式求细胞活力:
活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100
台盼蓝染色法注意事项:
台盼蓝染细胞时,时间不宜过长。否则,部分活细胞也会着色,会干扰计数。
台盼蓝染色方法:
A:胎盼蓝母液∶5×生理盐水=4∶1
B:台盼蓝A液∶细胞悬液=1∶2=20 μL∶40 μL
活细胞数=稀释倍数×1.5×104×四个方框总胎盼蓝拒染活细胞数/4
上海金畔生物科技有限公司是一家集产品研发、生产、销售、服务于一体的高科技生物企业。产品主要涵盖生化试剂、分子生物学试剂、细胞培养、免疫学产品及实验耗材等。台盼蓝染色液为上海金畔生物科技有限公司自产产品,其货号为C0040。台盼蓝为生物染色剂,如病毒检验,注入循环系统可使肾小管着色,哺乳动物、低等脊椎动物和昆虫的各种组织活体染色。