常见的蛋白酶抑制剂有哪些-技术文章

常见的蛋白酶抑制剂有哪些

蛋白酶是人类免疫缺陷病毒基因编码中的一种特异天冬酰蛋白酶,其作用是将基因和基因表达所产生的蛋白裂解,成为具有活性的病毒结构蛋白和酶。蛋白酶抑制剂从广义上指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合,使蛋白酶活力下降,甚至消失,但不使酶蛋白变性的物质。
不同蛋白酶抑制剂的作用
PMSF
1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);
2)10mg/ml溶于异丙醇中;
3)在室温下可保存一年;
4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);
5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。EDTA
1)抑制金属蛋白水解酶;
2)0.5mol/L水溶液,pH8~9;
3)溶液在4℃稳定六个月以上;
4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml);
5)加入NaOH调节溶液的pH值,否则EDTA不溶解。
胃蛋白酶抑制剂(pepstantin)
l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽酶,组织蛋白酶D和凝乳酶;
2)1mg/ml溶于甲醇中;
3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月;
4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L)
5)在水中不溶解。
亮抑蛋白酶肽(leupeptin)
1)抑制丝氨酸和巯基蛋白酶,如木瓜蛋白酶,血浆酶和组织蛋白酶B;
2)lOmg/ml溶于水;
3)储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月;
4)工作浓度0.5ug/ml。
胰蛋白酶抑制剂(aprotinin)
1)抑制丝氨酸蛋白酶,如血浆酶,血管舒缓素,胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶;
2)lOmg/ml溶于水,pH7~8
3}储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月;
4)工作浓度:0.06~2.0ug/ml(0.01~0.3umol/L);
5)避免反复冻融:
6)在pH>12.8时失活。

常见的蛋白酶抑制剂

抑制剂 靶蛋白酶 有效浓度 储藏溶液 注解
Antipain 木瓜酶和胰酶 50μg/ml 1mg/ml水溶液 对胰凝蛋白酶,胃液素,纤溶酶无影响
APMSF 胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶 10-40μg/ml或10-20μM 100mmol/L水溶液 毒性比PMSF低,不能抑制胰凝蛋白酶或乙酰胆碱酯酶
抑肽酶 丝氨酸蛋白酶 0.06-2μg/ml 10mg/mlPBS溶液 避免反复动冻融
抑氨肽酶B 氨基肽酶 40μg/ml 溶于甲醇 不能抑制羧肽酶
Calpain抑制剂Ⅰ、Ⅱ Calpain (钙依赖性半胱氨酸蛋白酶) Ⅰ:17μg/ml
Ⅱ:7μg/ml

溶于乙醇 可渗透薄膜
抑糜朊酶素 胰凝乳蛋白酶 6-60μg/ml 溶于DMSO
B.M.综合酶片 丝氨酸,半胱氨酸和金属蛋白酶 每10-50ml细胞提取液内加一片 不含EDTA
EDTA 金属蛋白酶 0.2-0.5mg/ml或0.5-1.3μmol/L 500mmol/L水溶液pH=8.0
抑蛋白酶醛肽 丝氨酸蛋白酶,巯基蛋白酶 0.5-2μg/ml 10mg/ml水溶液
a2-巨球蛋白 广谱 1∪/m 100∪/ml PBS 溶液 避免接触还原剂
Pefabloc SC(boe- hringer Mannheim) 丝氨酸蛋白酶 0.1-1.0mg/ml或0.4-4mmol/L 100mM水溶液 无毒,在中性pH下较PMSF 稳定
胃蛋白酶抑制剂 酸性蛋白酶 0.7μg/ml 1mg/ml甲醇溶液
PMSF 丝氨酸蛋白酶 17-170μg/ml 10mg/ml异丙醇溶液 每一操作步骤时新鲜加入
TLCK 胰蛋白酶 37-50μg/ml 1mg/ml溶于50mMmol/L醋酸盐溶液,pH=5.0 对胰凝蛋白酶无影响
TPCK 胰凝乳蛋白酶 70-100μg/ml 3mg/ml乙醇溶液 对胰蛋白酶无影响

上海金畔生物科技有限公司是一家集产品研发、生产、销售、服务于一体的高科技生物企业。产品主要涵盖生化试剂、分子生物学试剂、细胞培养、免疫学产品及实验耗材等。蛋白酶抑制剂为上海金畔生物科技有限公司自产产品,其货号为T8031,胰蛋白酶抑制剂能抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶及纤维蛋白溶解酶的活性;用于纤维蛋白溶解现象,是做蛋白测定中常用的抑制剂之一。

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