胰蛋白酶的配制方法介绍

胰蛋白酶是为蛋白酶的一种，在脊椎动物中，作为消化酶而起作用。在细胞培养试验中胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。

胰蛋白酶的配制方法一：

20ml0.25%胰蛋白酶的配制、过滤除菌与分装（1ml）

准备样品：

Try干粉，PBS缓冲液，离心管两个、冻存管20个、盒子一个、枪头1盒、灭菌器、注射器。

准备工作：将离心管、冻存管装载盒子中高温高压灭菌。

配制：

1.称取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液浓度为0.25％，用电子天平准确称取粉剂50mg溶入离心管PBS（PH到7.2左右）液中。搅拌混匀，置于4℃内过夜。

2.用注射滤器抽滤消毒：配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器（0.22微米微孔滤膜）抽滤除菌。

3.分装：将除菌之后的胰蛋白酶用移液枪分装到冻存管中，每个冻存管1ml，于-20℃保存以备使用。

普通胰蛋白酶配饰方法二：

1.按实验需要称取酶粉，用少量D-hank’s液将胰蛋白酶粉调成糊状。

2.加适量D-hank’s液（橙红色），低速磁力搅拌（室温4℃间断进行，室温高于30℃时要减少酶液在室温中的搅拌时间）至酶液溶解。

3.溶解后的酶液（深红色），滤过除菌，小瓶分装，-20℃冻存。

胰蛋白酶溶液的配置方法三：

1.称取胰蛋白酶粉末置烧杯中，先用少许D-Hanks平衡盐溶液（pH7.2左右）调成糊状，然后再补足D-Hanks平衡盐溶液，搅拌混匀，置室温4小时或冰箱过夜，并不断搅拌振荡；

2.次日，先用滤纸粗滤，再进行过滤除菌，分装入瓶中，低温冰箱保存备用，常用浓度为0.25%或0.125%。胰蛋白酶溶液偏酸，使用前可调用碳酸氢钠溶液调pH至7.2左右。

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