抗酸染色试剂盒的染色原理及使用说明

抗酸染色法acid－fast staining method 1882年由埃利希（F．Ehrlich）首创并经F．齐尔（Ziehl）改进而创造出的细菌染色法。抗酸染色用于细菌标本图片或菌落涂片的染色。

抗酸染色法原理：

分枝杆菌细胞壁含脂质较多，包围在肽聚糖的外面，所以分枝杆菌一般不易着色。分枝杆菌其中主要成分为分枝菌酸，此物具有抗酸性。染色时与石炭酸复红结合牢固，能抵抗酸性乙醇的脱色作用，因此抗酸菌能保持复红的颜色，达到染色目的。

齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物，用盐酸酒精处理也不脱色。当再加碱性美兰复染后，分枝杆菌仍然为红色，而其他细菌及背景中的物质为蓝色。

抗酸染色法步骤：

1）初染用玻片夹夹持涂片标本，滴加石炭酸复红2-3滴，在火焰高处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽即暂时离开，若染液蒸发减少，应再加染液，以免干涸，加热3-5分钟，待标本冷却后用水冲洗。

2）脱色3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟；用水冲洗。

3）复染

上海金畔生物科技有限公司为生化试剂供应商，抗酸染色试剂盒为上海金畔生物科技有限公司自产产品。抗酸染色用于细菌标本涂片或菌落涂片的染色。常用于对分枝杆菌属进行初步鉴别。普通细菌染色比 较容易着色，而分支杆菌细胞壁含脂质较多，染色比较困难，必须加热才能被石炭酸复红着色。分枝杆菌 菌体着色后，能抵抗盐酸酒精等酸性脱色剂的脱色，而其他细菌和细胞等均被脱色。当再用碱性美蓝复染后，分支杆菌仍为红色，其他细菌与背景呈蓝色。

抗酸染色试剂盒使用方法：

1、 做一适当厚度的涂片，干燥后火焰固定。

2、 滴加抗酸染色液 A 于玻片上，覆盖住样本，在酒精灯上加热，切勿沸腾，出现蒸汽即暂时移开，必要时可续加染色剂以免干涸。加热 3-5 分钟。

3、 移开火，静置 5 分钟，待标本冷却后以自来水冲洗。

4、 用抗酸染色液 B 脱色（大约 1 分钟）至无红色染液脱出为止。完全脱色可避免产生假阳性结果。

5、 自来水缓慢冲洗后，滴加抗酸染色液 C 复染约 30 秒，水洗。

6、 待干后油镜观察。

抗酸染色试剂盒注意事项：

1.  染色程度可通过改变染色时间或染色温度做适当调整。

2.  每次试剂用完后，请迅速盖好，以免挥发。

3.  石炭酸对皮肤、粘膜有强列刺激性和腐蚀性，使用时请穿实验服并戴一次性手套操作。