封闭用脱脂奶粉的常见问题

脱脂奶粉可用于制备微生物培养基；配制ELISA、western等实验的封闭液。western blot经过转印以后，膜上有了蛋白，但是还有很多地方是没有蛋白覆盖的，通过脱脂奶粉的蛋白孵育后，这些空白的膜都被脱脂奶粉的蛋白覆盖了，就防止后续孵育的一抗和二抗与印迹膜的非特异结合。在科研实验中，脱脂奶粉也是常用的生化试剂之一。

关于脱脂奶粉和BSA作为封闭剂的一些问题

问：western blot中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么?

答：脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原?的蛋白去封闭膜，避免标记抗体固定在膜上引起背景增高。

问：请问封闭液和抗体稀释液用BSA?和脱脂奶粉有什么区别呢?

答：所谓封闭是用以减少或消除载体上的非特异性结合蛋白的分子，一般是脱脂奶粉或BSA。对WesterBlot来说两者均为常用封闭剂。脱脂奶粉的成份远较BSA复杂，如果要做ELISA或者phage display时候，我们还是用BSA。我推测也没有依据说脱脂奶粉就绝对不能用，注意的是各种品牌的脱脂奶粉中残留的脂质量不同， 脂质是会影响实验结果的，即使是用于WesterBlot也要有所挑选。

问：封闭的时候，为什么一定要用脱脂奶粉?

答：膜上有蛋白缺损点，不用蛋白封蛋白缺损点容易出现非特异染色。也可用BSA封，效果并不比脱脂奶粉好。

问：western封闭为什么用脱脂牛奶，不用全脂的？

答：是因为如果含有脂肪的话，乳脂会与奶粉中的蛋白结合，导致封闭的时候蛋白浓度下降，影响封闭的效果，有可能造成封闭不完全，所以都会用脱脂的奶粉来做。

上海金畔生物科技有限公司为生化试剂供应商，专业生产销售生化试剂、生物试剂、细胞培养基、试剂盒、实验耗材等产品。脱脂奶粉为上海金畔生物科技有限公司常备货产品，常用作配置封闭液，细胞培养等试验中。