上海金畔生物科技有限公司DAPI溶液的简单介绍

DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB（ethidium?bromide）相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。因为DAPI可以透过完整的细胞膜﹐它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时，最大吸收波长为358nm，最大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色，且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠，可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。

（1）用1mLddH2O将DAPI溶解，制得2.9mM的DAPI溶液（1mgDAPI/1mL?H2O）。

注：DAPI不能直接用PBS等缓冲溶液溶解，需要先用水将其溶解。

（2）取适量DAPI水溶液加到PBS中，制备成10~50μM的DAPI溶液。推荐以下PBS的配制方法：?将8.00g?NaCl、0.20g?KCl、2.9g?Na2HPO4·12H2O、0.2g?KH2PO4溶解于1L纯水中。

（3）将1/10培养基体积的DAPI溶液加入到细胞培养基中。也可以1/10浓度的DAPI缓冲液代替培养基。

（4）在37℃培养细胞10~20分钟。

（5）用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

（6）用带有360nm激发波长，460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

DAPI溶液注意事项

1)DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

2)荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

上海金畔生物科技有限公司为生化试剂供应商，专业生产销售生化试剂、生物试剂、细胞培养基、试剂盒、实验耗材等产品。DAPI溶液为上海金畔生物科技有限公司常备货产品，其货号为C0060。DAPI溶液，纯度≥90%，浓度为1mg/ml。使用时根据实验不同直接将本产品用相应溶液稀释到工作浓度。