红细胞裂解液配方及红细胞裂解

 红细胞裂解液的原理是氨根离子不能透过细胞膜，而其他离子可以，这样会造成细胞内部的离子浓度高于外部溶液内的离子浓度。这样就造成了渗透压差，外部的水分会进入到细胞内，造成细胞膨胀。而红细胞由于细胞结构较为简单，仅有细胞膜结构，对于膨胀的耐受能力较差，因此绝大部分就会被涨破，受到破坏。

红细胞裂解液配方：

A． 甲酸：1.2ml/L，溶于水中；

B． 碳酸钠：6g/L

氯化钠：14.5g/L

硫酸钠：31.3g/L，溶于水中，

C：多聚甲醛：10g/L，溶于PBS中

使用方法：

A液600ul 振荡15s

B液265ul 振荡 15s

C液100ul 振荡15s

红细胞裂解方法　

　取100 μl抗凝全血，加2 ml应用液3#，混匀15～20 s；加2 ml应用液2#，混匀15～20 s；加4 ml应用液1#，混匀15～20 s；300×g离心2 min，弃上清；收集沉淀，加PBS缓冲液，制成白细胞悬液，备用。

（这种红细胞裂解法满足了白细胞流式细胞仪检测分选要求，价格低廉，是一种简便快捷、经济实用的白细胞纯化分选方法。

（二）红细胞裂解液(0.01mol/L Tris-HCL pH7.6; 0.01mol/L NaCl; 0.005mol/L MgCl2)

（三）红细胞裂解液（139.6 mmol/L NH4Cl, 16.96 mmol/L Tris, 用1 mol/L HCl调 pH至7.2）

（四）红细胞裂解液的制备：碳酸氢钾（KHCO3）1.0g；氯化氨（NH4CL）8.3g；EDTA-Na2 0.037g，加双蒸水至1000ml，即工作液。（该配方出自《实用流式细胞术彩色图谱》）