ms培养基工作液的配制步骤和配方表-技术文章

ms培养基工作液的配制步骤和配方表

 MS培养基是目前使用最普遍的培养基。下面介绍ms培养基工作液的配制步骤及配方表。

(1)配制1升工作液,烧杯中放入700ml左右的蒸馏水,按顺序分别吸取MS-A母液20ml、MS-B母液10ml、MS-C母液10ml、MS-D母液10ml、MS-E母液10ml。

(2)加入固体蔗糖30g(根据具体实验调节浓度),溶解。

(3) 加入所需的激素。定容至1000ml。

(4)0.1-1mol/l的HCl或NaOH调整pH值。

(5)如果配制固体培养基加入一定浓度的琼脂。琼脂浓度为10%~15%。

(6) 液体培养基可选择高温高压灭菌和过滤消毒2种方法。固体培养基采用高温高压灭菌方法。倒入三角瓶等培养器皿中,封口消毒。

(7)工作液配制的注意事项:

由于培养基内有丰富的营养物质,极利细菌和真菌繁殖,造成污染,影响组培的成功,一般有高温高压消毒和过滤消毒两种方法。

高温高压消毒: 一般用消毒锅消毒,注意消毒锅不能装的过满,锅内保持1.1Kg/cm2的压力,温度120℃左右,大约15-20分钟即可。

过滤消毒: 一些易受高温破坏的培养基成分如IAA、IBA、ZT等,不宜用高温高压法消毒,可用过滤消毒,可过滤消毒后再加入已高温高压消毒的培养基中,过滤消毒应在无菌室或超净工件台上进行,以避免污染培养基。

附表:

    MS培养基基本工作液质量表
组成成分
数量(mg/l)
组成成分
数量(mg/l)
NH4NO3
1650
Na2-EDTA
37.3
KNO3
1900
FeSO4·7H2O
27.8
CaCl2·2H2O
440
CuSO4·5H2O
0.025
MgSO4·7H2O
370
蔗糖
30
KH2PO4
170
肌醇
100.0
KI
0.83
烟酸
0.5
H3BO3
6.2
盐酸吡哆醇
0.5
MnSO4·4H2O
22.3
甘氨酸
2.0
ZnSO4·7H2O
8.6
盐酸硫铵等
0.4
Na2MoO4·2H2O
0.25
 
 
CoCl2·6H2O
0.025
pH
5.8

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