ttc染色步骤及结果辨别
TTC是脂溶性光敏感复合物,1894年首次合成用来检测种子的生存能力,1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。下面介绍TTC染色步骤:
1、将新鲜组织切片置装有TTC染色液的最小器皿中(如小培养皿或6孔板、12孔板、24孔板中),37℃避光孵育15-30分钟(孵育箱可以是气浴箱或水浴箱)。边孵育边观察样本颜色变化。
2、将已染过的TTC染色液用移液器取出放到另一个器皿中,4-8℃保存(TTC染液可反复染色2-3次。)
3、然后吸取已配好的组织冲洗应用液将组织表面多余的染色液冲洗掉,此时可肉眼观察并立即照相。
4、若需长久保存,可以用4%多聚甲醛固定液固定。
根据ttc染色原理,染色结果辨别:
动物组织:非梗死区染为红色,梗死区呈灰白色,红色区与灰色区之间为缺血区。
植物样本:活组织呈玫瑰红色,死组织及无生命力的组织不着色。