红细胞裂解液的原理及使用说明

红细胞裂解液是一种比较温和的红细胞去除方法。既不损伤有核细胞又能充分的去除红细胞。经红细胞裂解液裂解得到的组织细胞中不含红细胞，可进一步用于原代细胞培养、细胞融合、核酸与蛋白的分离和提取等。

红细胞裂解的原理

红细胞表面上有红细胞专属的表面抗原，当裂解液中含可以攻击特定红细胞表面细胞抗原的酶的时候，就只会造成红细胞的变形，生物通道扩大、膨胀、裂解，而不会攻击其他细胞。另外红细胞有自己的电负性、渗透脆性、悬浮稳定性、这都是区别于其他种类细胞的区别点。红细胞裂解液就是利用这些特性裂解红细胞的。

红细胞裂解液的使用说明

1. 1倍体积的新鲜全血，加入3倍体积的红细胞裂解液。如1ml新鲜全血加入3ml红细胞裂解液，轻轻涡旋或颠倒混匀。

2. 冰上放置15分钟，其间轻轻涡旋混匀两次，红细胞裂解后，溶液应该是清亮透明的。

3. 收集细胞：4℃，450×g离心10分钟以沉淀白细胞，小心吸弃上清液。

4. 向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液，轻轻涡旋充分重悬白细胞。如起始血液为1ml，则加入2ml的红细胞裂解液。

5. 4℃，450×g离心10分钟沉淀白细胞，小心并彻底吸去上清液。

6. 重悬细胞，用于后续实验；如提取RNA，最好于此步开始使用DEPC水配制的溶液进行操作。

红细胞裂解液的配置方法

取100 μl抗凝全血，加2 ml应用液3#，混匀15～20 s；加2 ml应用液2#，混匀15～20 s；加4 ml应用液1#，混匀15～20 s；300×g离心2 min，弃上清；收集沉淀，加PBS缓冲液，制成白细胞悬液，备用。（这种红细胞裂解法满足了白细胞流式细胞仪检测分选要求，价格低廉，是一种简便快捷、经济实用的白细胞纯化分选方法。）

红细胞裂解液的注意事项

1、本裂解液为无菌产品，分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作。

2、为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3、 储存液储存于2-8°C不能超过半年(六个月)。

4、使用时根据需要稀释,每次用都应用去离子水新鲜配制工作液,当日用不完的可废弃。

北京上海金畔生物科技有限公司科技有限公司为红细胞裂解液生产厂家，货号为R1010，常卖规格为100ml 、500ml。上海金畔生物科技有限公司生产的红细胞裂解液是利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀破的原理来裂解无核红细胞的。产品经过无菌处理，主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。