4%多聚甲醛固定液配制
4%的多聚甲醛溶液通常是作为流式标本的储存液,保存在2-8℃。要使用时,可用PBS稀释至工作液(应用液)。因为甲醛有毒,所以在配置4%的多聚甲醛固定液时要做好防护措施。下面详细介绍4%多聚甲醛固定液配制步骤和方法。
4%多聚甲醛固定液配制需材料和设备:
去离子水、HCl (稀)、NaOH (1 N)、多聚甲醛粉末、1X PBS(0.137 M NaCl, 0.05 M NaH2PO4, pH 7.4)、0.22μm滤膜、玻璃器皿、手套和保护眼镜、磁力搅拌器、温度计、通风柜
步骤:
要配制1 L的4%多聚甲醛,在通风柜中,将800 mL的1X PBS加入玻璃烧杯,边搅拌边加热至约60℃,注意不能让溶液沸腾。
往热PBS溶液中加入40g多聚甲醛粉末。
多聚甲醛粉末可能不会立即溶解,可通过滴入1N NaOH搅拌逐步提高pH值,直至多聚甲醛粉末完全溶解。
待溶液冷却,过滤溶液,用PBS调节溶液体积至1L。
检查pH值,用稀盐酸调节pH值至6.9左右。
保存:
4%的多聚甲醛溶液可分装成多管冻存,或者保存在2-8℃大约1个月。
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