茜素红染色步骤及部分试剂配制

茜素红是橙黄色或黄棕色粉末。常用于细胞染色。下面就详细介绍了茜素红染色步骤及部分生化试剂配制方法。

茜素红染色

1.培养皿用PBS冲洗2次，95%乙醇固定10min，蒸馏水冲洗3次

2.0.1%茜素红－Tris-Hcl(PH 8.3)37度，30min，

0.1%茜素红－Tris-Hcl(PH 8.3)

1g Tris（1g左右Tris均可） 加入三蒸水100ml中，用滴管往配制液中加HCl（分析醇），一滴滴地加，边加边测试PH，待PH为8.3左右即可（无精密PH测试仪，用PH试纸也是一样的，但是要能测到8点几的PH试纸），配好后往里面加0.1g的茜素红，便得到0.1%茜素红－Tris-Hcl(PH 8.3)溶液。

Cultured pulp cells in 24-muiltiplates were fixed in 10% formalin and incubated with 1% Alizarin Red S (Sigma-Aldrich Co., St Louis, MO, USA) solution for 10 min at RT for Alizarin Red S staining Dahl-McGec-Russell茜素红S法：

固定：10%缓冲的甲醛液避免用含钙的固定液。固定2小时

试剂配制：

1。茜素红S染色液配制：

茜素红S 1g    蒸馏水 90ml    1%氢氧化铵 10ml

此液PH值应在6.3左右，此溶液至少可保存1个月。

2。醋酸液：

醋酸 0.2~1ml    蒸馏水 100ml

3。淡绿液：

淡绿 0.2g

蒸馏水 100ml

染色方法：

1.切片脱蜡至水

2.入茜素红S液中 5 min

3.快速蒸馏水流

4.淡绿 20-30秒

5.醋酸液速洗

6.无水酒精快速脱水

7.二甲苯透明，中性树胶封固。

1、1M Tris-HCl （pH7.4，7.6，8.0）

□组份浓度 1 M Tris-HCl

□配制量 1L

□配置方法 1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值 浓HCl

7.4 约70mL

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