染色液丽春红配制和使用说明-技术文章

染色液丽春红配制和使用说明

 常用的丽春红染色液有两种,下面我们分别对两种丽春红配制做解释。

一种用乙酸配制,另外一种用三氯乙酸(TVA)和5-磺基水杨酸(5-Sulfosalicylic acid)配制。配制方法如下:

一、用乙酸配制成分:0.1%(w/v)丽春红,5%(v/v)乙酸,ddH 2 O。4 ℃保存,不要冻上。也可以配成“0.2%(w/v)丽春红,3%(v/v)乙酸,ddH 2 O”。

二、用三氯乙酸和5-磺基水杨酸成分:2% (w/v)丽春红,30%的三氯乙酸,30%的5-磺基水杨酸。

丽春红染色液使用说明:

将PVDF膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在丽春红染色液中,摇动5-10分钟或更长时间;取出印迹膜,用蒸馏水,PBS或其它适当溶液漂洗2-3次,可出现清晰条带,记录结果;用蒸馏水,PBS或其它适当溶液漂洗2-3次,每次3-5分钟,去除丽春红,进行后续的WB检测。

补充:丽春红染色液也可以直接用来染PAGE胶,不过,在染色之前最好用甲醇-乙酸溶液浸泡一下PAGE胶,起到固定蛋白的作用。

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