试剂盒提取植物dna步骤-分子生物实验

上海金畔生物科技有限公司试剂盒提取植物dna步骤

 试剂盒提取植物dna已经获得广泛应用。各个生化试剂厂家也都有了dna提取试剂盒产品。上海金畔生物科技有限公司作为国内知名生化试剂供应商提供了各类dna提取试剂盒。今天给大家介绍试剂盒提取植物dna步骤。当然是以上海金畔生物科技有限公司产植物基因组dna提取试剂盒产品为例。

使用前先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、植物组织预处理:取新鲜植物组织(不超过 100mg)或干重组织(不超过 20mg),于液氮中充分研磨至细粉状,让液氮自然挥发。

2、将研磨好的植物组织粉末迅速转移到预先装有 400ul 溶液 A、20ul RNase A(10mg/ml)和 5ul β-巯基乙醇的离心管中,充分颠倒混匀,室温放置 10min。

3、加入 140ul 溶液 B,充分颠倒混匀,12000rpm 离心 10min,将上清转移至新离心管(约 400-500ul),注意不要吸入沉淀。

4、加入和上清相同体积的溶液 C,充分颠倒混匀,再加入和溶液 C 相同体积的无水乙醇,此时若出现絮状物,将絮状物吹散后一起加入吸附柱中,12000rpm 离心 5min,弃废液,一次加不完可分两次加入。

注意:如果吸附柱膜呈绿色或离心时有堵塞现象,可向吸附柱中加入 600ul 无水乙醇,并适当延长离心时间。

5、 向吸附柱中加入 600ul 漂洗液(请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm 离心 1min,弃废液,将吸附柱放回收集管。

6、向吸附柱中加入 600ul 漂洗液,12000rpm 离心 1min,弃废液,将吸附柱放回收集管中, 12000rpm 离心 2min。

7、将吸附柱置于室温或 50℃温箱放置数分钟,否则残余的乙醇可能会影响后续的实验如酶切、PCR 等。

8、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加 50-200ul 经 65℃水浴预热的洗脱液,室温放置1-5min,12000rpm 离心 2min,即可得到高质量的植物基因组 DNA。

9、(可选)离心所得洗脱液再加入吸附柱中,室温放置 2min,12000rpm 离心 2min。

以上是上海金畔生物科技有限公司植物基因组dna提取试剂盒使用步骤。如果还有不理解可以联系上海金畔生物科技有限公司技术支持部分获取帮助。

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