考马斯亮蓝染色原理-蛋白质研究

考马斯亮蓝染色原理

 考马斯亮蓝染色法也称考马斯蓝法(coomassie blue staining)又称Bradford法。是测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。由于其突出的优点,正得到越来越广泛的应用。下面就着重介绍下考马斯亮蓝染色法原理。

考马斯亮蓝染色是测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立,试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量,测定蛋白质浓度范围为0~1 000μg/mL,最小可测2.5μg/mL蛋白质,是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。

考马斯亮蓝分为R-150、R-250、R-350、G-250等。其中R-350最为灵敏,R为红蓝色,G为绿蓝色。上海金畔生物科技有限公司是专业生化试剂供应商。提供考马斯R-250、G-250等染色液,常备现货,欢迎老师、同学订购。

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