上海金畔生物科技有限公司红细胞裂解液使用方法
红细胞裂解液是一种去除红细胞最简便易行的方法,然而各厂家的红细胞裂解液使用方法又不尽相同。下面就以上海金畔生物科技有限公司所产的红细胞裂解液为例详细说明使用方法。
红细胞裂解液是利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀破的原理来裂解无核红细胞的。 红细胞裂解液经无菌处理,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。
红细胞裂解液使用说明:
1. 1倍体积的新鲜全血,加入3倍体积的红细胞裂解液。如1ml新鲜全血加入3ml红细胞裂解液,轻轻涡旋或颠倒混匀。
2. 冰上放置15分钟,其间轻轻涡旋混匀两次,红细胞裂解后,溶液应该是清亮透明的。
3. 收集细胞:4℃,450×g离心10分钟以沉淀白细胞,小心吸弃上清液。
4. 向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液,轻轻涡旋充分重悬白细胞。如起始血液为1ml,则加入2ml的红细胞裂解液。
5. 4℃,450×g离心10分钟沉淀白细胞,小心并彻底吸去上清液。
6. 重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,最好于此步开始使用DEPC水配制的溶液进行操作。(组织细胞处理:新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液,其余同上。
注意事项:
红细胞裂解液为无菌产品,分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作。
为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
如果你在红细胞裂解液使用过程中还有使用方法上有疑问可以查阅上海金畔生物科技有限公司红细胞裂积液说明书或者拨打上海金畔生物科技有限公司技术支持电话:400-968-6088寻求技术帮助。或在线联系客服。