苏木精染色原理及配制-技术文章

苏木精染色原理及配制

 天然染料苏木精是从苏木(Haematoxylon campechianum)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一,是一种天然媒介染料。苏木精染色原理是,苏木精染色后的细胞核呈现蓝色,细胞浆呈现粉红色或红色。进行免疫染色后的复染,操作步骤简便,操作时间短。可以操作步骤简便,操作时间短或培养细胞的染色,或与免疫组织化学、免疫细胞化学、免疫荧光、原位杂交等配合使用。使用苏木素染色液染色后还可以进行免疫染色或其它染料的复染。

  而苏木精不能直接染色,必须暴露 在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色 力愈强。下面介绍苏木精配制方法和步骤。

1.试剂准备:

  苏木精10 g,硫酸铝钾80 g,无水乙醇200 ml,蒸馏水2000 rnl,氧化汞3 g,冰乙酸40ml。

2.配制步骤

(1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内,加入80 g硫酸铝钾后置电炉或电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。

(2)将200 ml无水乙醇注入一只300 ml的三角烧瓶内,加入10 g苏木精摇动使之完全溶解。

(3)将已完全溶解于无水乙醇的苏木色精液体缓缓注入已完全溶解的2000 ml硫酸铝钾液体中,继续加热至液体沸腾关闭电源。此时液体应呈透明的玫瑰红色。

(4)将3 g氧化汞溶于20ml蒸馏水中搅匀后缓缓(一定要缓慢)方入未被氧化的苏木精液体中,边加氧化汞边搅拌。此时苏木精被氧化,液体的颜色会迅速地变成深蓝紫色。

(5)氧化汞加完后用玻棒充分的搅拌液体并继续加热至液体再度沸腾关闭电源。

(6)用湿毛巾保护,将装有停止沸腾的热苏木精的三角烧瓶转移至冷水中迅速降温至室温。

(7)密封瓶口室温避光直射储存备用,临用前每100 ml苏木精液加入2~3 ml冰乙酸混匀。 

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