Masson 三色染色试剂盒染色原理方法-技术文章

Masson 三色染色试剂盒染色原理方法

                                                                                  Masson 三色染色试剂盒染色原理方法

     结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维(collagen  fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。
     Masson三色染色是结缔组织染色中最经典的一种方法,是显示组织中纤维的主要方法之一,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关,分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量都很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
Masson 三色染色试剂盒主要成份:  
1.weigert铁苏木素A液 
2.weigert铁苏木素B液 
3.丽春红酸性品红染液 
4.磷钼酸溶液 
5.苯胺蓝溶液
样本要求:  组织片充分固定和脱蜡。  
Masson 三色染色试剂盒染色方法:  
1.组织固定于bouin氏液或zenker氏液,流水冲洗过夜,常规脱水包埋 
2.切片脱蜡至水 
3.weigert铁苏木素(weigert铁苏木素A、B液等比例混和)染5-10分,流水稍洗
4. 1%盐酸酒精分化,流水冲洗数分 
5. 丽春红酸性品红染液染5-10分,流水稍冲洗。 
6.磷钼酸溶液处理约5分钟,不用水洗,直接用苯胺蓝人染液复染5分钟  
7. 1%冰醋酸处理1分钟,95%酒精脱水多次。.无水酒精脱水、二甲苯透明,中性树胶封固。 
Masson 三色染色检验结果:
  胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色,肌纤维、纤维素和红细胞染红色、胞核染蓝黑色。、
注意事项: 
1.weigert铁苏木素分A、B两液,应与临用前将两液等分混合,而不宜预先混合,否则容易氧化沉淀而逐渐失去染色能力。 
2.组织用bouin氏液或zenker氏液固定为佳,如已用10%甲醛液固定,切片可在脱蜡至水后,再放入bouin氏液作用一晚或置37℃温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。 
3.磷钼酸处理时,要镜下控制,见肌纤维呈红色,胶原纤维呈淡红色即可。
        北京上海金畔生物科技有限公司科技有限公司自产试剂盒 Masson 三色染色试剂盒,货号为G1340,常卖规格为7*50ml和7*100ml两种。主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。 由mallory三色染色改造,利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色,与阴离子染料分子大小和组织的渗透性有关。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成份显示出来。 
 

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