动物基因组DNA提取方法及步骤介绍

基因组DNA提取是最常见分子生物学实验之一。今天给大家介绍的是动物基因组DNA提取。DNA是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象，为了进行测序、杂交、基因表达、文库构建等实验，获得高分子量和高纯度的基因组DNA是非常重要的前提，因此基因组DNA的提取也是分子生物学试验技术中最重要、最基本的操作之一。

动物基因组DNA提取实验步骤：

1、取新鲜或冰冻动物组织块0.1g（0.5cm3），尽量剪碎。置于玻璃匀浆器中，加入1ml的细胞裂解缓冲液匀浆至不见组织块，转入1.5ml 离心管中，加入蛋白酶K （500ug/ml）20μl，混匀。在65℃恒温水浴锅中水浴30min，也可转入37℃水浴12～24h，间歇振荡离心管数次。于台式离心机以12000 rpm离心5min，取上清液入另一离心管中。

2、加2倍体积异丙醇，倒转混匀后，可以看见丝状物，用100ul 吸头挑出，凉干，用200ul TE 重新溶解。（可进行PCR反应等，需要进一步纯化的按下列步骤进行）

3、加等量的酚：氯仿：异戊醇振荡混匀，离心12000 rpm，5min。

4、取上层溶液至另一管，加入等体积的氯仿?异戊醇，振荡混匀，离心12000 rpm，5min。

5、取上层溶液至另一管，加入1/2体积的7.5mol/L乙酸氨加入2倍体积的无水乙醇，混匀后室温沉淀2min ，离心12000 rpm ,10min。

6、小心倒掉上清液，将离心管倒置于吸水纸上，将附于管壁的残余液滴除掉。

7、用1ml 70%乙醇洗涤沉淀物1次，离心12000 rpm ， 5min。

8、小心倒掉上清液，将离心管倒置于吸水纸上，将附于管壁的残余液滴除掉，室温干燥。

9、加200ul TE重新溶解沉淀物，然后置于4℃或?C20℃保存备用。

10、吸取适量样品于GeneQuant上检测浓度和纯度。

在动物基因组DNA提取试验中要特别注意以下几点：

1、尽量简化操作步骤，缩短提取过程。

2、减少化学因素对核酸的降解。

3、减少物理因素对核酸的降解：机械剪切力和高温。

4、防止核酸的生物降解：排除核酸酶。 想要查看动物基因组DNA提取更详细信息，请点击查看上海金畔生物科技有限公司实验库： 动物基因组DNA提取 。全面介绍了本实验原理、操作步骤、注意事项等。提供全部本实验生化试剂、耗材、仪器。欢迎选购。