RIPA组织/细胞裂解液与非变性组织细胞裂解液的应用-技术文章

RIPA组织/细胞裂解液与非变性组织细胞裂解液的应用

                                                                            RIPA组织/细胞裂解液与非变性组织细胞裂解液的应用

       RIPA组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜(包括核膜)。而非变性组织/细胞裂解缓冲液内含非离子型去垢剂,能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非变性条件下的裂解蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能,如抗原-抗体结合或酶学活性,因此适宜于进行免疫共沉淀。另外,有些抗体对非变性蛋白具有更高的结合能力或只能识别非变性蛋白的抗原位点,这种情况应该使用非变性裂解。

细胞裂解液的裂解作用:
主要是裂解液处理法,细胞裂解液的主要目的有以下几种:
利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞;
溶解蛋白;
蛋白变性使其稳定;
抑制蛋白酶活性。
       主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,主要有提取核酸和蛋白两中。在提取RNA或DNA时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更多的核酸;如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液,在提取蛋白后,再根据实验需要复性蛋白等。         细胞裂解中常用试剂和其作用:
50 mM Tris-HCl pH 7.4(缓冲体系),150 mM NaCl(等渗体系),1 mM PMSF (强大的蛋白酶抑制剂),1 mM EDTA(变性剂和稳定剂),5 μg/ml Aprotinin(蛋白酶抑制剂),5 μg/ml Leupeptin(蛋白酶抑制剂),1% Triton x-100(破坏细胞),1% Sodium deoxycholate(中度变性剂和蛋白溶解剂),0.1% SDS(强变性剂和蛋白溶解剂)。7M 尿素,2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解),蛋白酶K等。
        北京上海金畔生物科技有限公司科技有限公司自产产品非变性组织/细胞裂解液,货号为R0030,用于对非变性蛋白具有更高的结合能力或只能识别非变性蛋白的抗原位点的裂解。具有裂解作用的产品还有R0010,高效 RIPA组织/细胞裂解液和R0020,RIPA组织/细胞裂解液等。
 
北京上海金畔生物科技有限公司科技有限公司自产组织细胞裂解液的区别:
货号 : R0010                 
名称 :高效RIPA组织细胞裂解液 
有效裂解成分: SDS,NP-40,脱氧胆酸钠,
裂解强度 :  强   
蛋白酶抑制剂 :含, 配有PMSF   
蛋白状态:   变性   
主要用途 :   WB、IP  
 
货号 :   R0020                              
名称 :   RIPA组织细胞裂解液           
有效裂解成分 :  1% NP-40,0.1% SDS 
裂解强度 :     中       
蛋白酶抑制剂 :   含,配有PMSF                
蛋白状态 :           变性                      
主要用途 :      WB、IP   
 
货号 : R0030
名称 : 非变性组织细胞裂解液
有效裂解成分 :NP-40,Triton X-100
裂解强度 :  温和
蛋白酶抑制剂 : 含,配有PMSF
蛋白状态 :保持活性状态
主要用途 : WB, IP,co-IP
 

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