遗传霉素(G-418)的作用-技术文章

遗传霉素(G-418)的作用

                                                                                                       遗传霉素(G-418)的作用

       遗传霉素(geneticin, G418)又称新霉素,是一种氨基糖苷类抗生素, 是细胞稳定转染最常用的抗性筛选试剂。G418能阻断蛋白质合成,对细菌、酵母、高等植物以及哺乳动物细胞均具有氨基糖苷类毒性,用于真核细胞从转座子Tn5和Tn601稳定转染新霉素(neo)抗性基因的选择和维持。经常用于基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面。
 
基本参数:
G418 :白色粉末,融点138~144℃,溶于水、甲醇。 
CAS No.:108321-42-2
分子式 :C20H40N4O10.2H2SO4 
分子量 :692.71
效价: >700 ug/mg
使用方法:
        由于各真核细胞系对G418敏感度不同,各新细胞系或株稳定转染时杀死非稳定转染细胞所需用量需要通过实验优化。最适用量通过建立细胞死亡曲线获得。将细胞稀释至1000cell/ml,每孔100ul加入有培养基的24孔板,将每孔中的G418浓度稀释至0,100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000,1100ug/ml等12个级别, 培养10-14天,以细胞全部死亡最低浓度为基准,一般400-800左右,筛选时比该浓度再高一个级别,维持时使用筛选浓度的一半即可。
储运:室温下运输, 干粉在室温下储存,溶液于-20℃储存。
       北京上海金畔生物科技有限公司科技有限公司备有现货产品遗传霉素(G-418),货号为G8161,常卖规格为100mg,科研实验用试剂。遗传霉素(G-418)类似庆大霉素。在细菌,酵母,原生动物,高等植物及哺乳动物这类原核或真核细胞中抑制蛋白合成。广泛应用于转化了含抗遗传霉素基因质粒的真核细胞的筛选。
 

nunc