石蜡切片免疫组化步骤及所需生化试剂列表-蛋白质研究

石蜡切片免疫组化步骤及所需生化试剂列表

   石蜡切片免疫组化实验是根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后,加入底物显色。石蜡切片免疫组化实验由于多聚物在体内不存在,又不使用生物素,从而避免了由于生物素引起的非特异性背景染色,背景比SABC、SP法清晰。

  下面详细介绍实验步骤:

  第一步:石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4的PBS冲洗三次,每次3分钟(3×3’)。

  第二步:取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液,加入微波盒中,微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,中档微波处理10分钟,取出微波盒流水自然泠却,从缓冲液中取出玻片,先用蒸馏水冲洗两次,之后用PBS冲洗2×3’。(注:不是所有的抗体都需要微波修复的,视具体情况而定)

  第三步:每张切片加1滴3%H2O2,室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3×3’。

  在此免疫组化实验中可能需要用的试剂及仪器耗材包括:PBS、柠檬酸盐缓冲液、蒸馏水、增强剂、酶标抗鼠、兔聚合物、苏木素、酒精、二甲苯、树胶、盐酸、二氨基联苯胺。

  上海金畔生物科技有限公司科技有限公司是专业生化试剂生产和销售公司。提供石蜡切片免疫组化实验全部试剂和耗材,欢迎订购。

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