D-虫荧光素游离酸
别名 | D-虫荧光素游离酸 |
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英文名称 | D-Luciferin, free acid |
CAS | 2591-17-5 |
分子式 | C11H8N2O3S2 |
分子量 | 280.32 |
储存条件 | -20°C干燥避光保存 ,保质期12个月 |
纯度 | ≥99% (HPLC) |
外观(性状) | 白色粉末 |
单位 | 瓶 |
产品描述:
D-虫荧光素(D-Luciferin)是萤火虫荧光素酶底物,其量子效率为0.88,是Luminol的20倍。反应原理:首先,在镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应,接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin-luciferase发光用于ATP监控以测定细胞活力以及细菌计数。它还用于报告基因检测。可与小动物活体成像系统配套使用,用于标记LUC基因后的体内活体荧光检测。
应用:
(1) 体外分析
(2) 活体成像分析
(3) 高灵敏度ATP分析
使用方法:
1. 活体成像分析方法
(1) 用DPBS(w/o Mg2+ 、Ca2+ )配置D-Luciferin工作液(15mg/mL)* ,0.2 μm滤膜无菌过滤。
(2) 注射量:10μL/g的体重,如10g 重小鼠,注射100μL 工作液(1.5 mg D-Luciferin)。
(3) 腹腔注射10~15分钟后,上机进行图像分析。
2. 体外分析方法
(1) 用无菌水配置200× 的D-Luciferin储备液(30mg/mL)*,立即使用,或-20℃保存。
(2) 用预热好的完全培养基1∶200稀释D-Luciferin储备液,配置工作液(150μg/mL)。
(3) 去除培养细胞的培养基。
(4) 进行图像分析前,向细胞中添加1× 的D-Luciferin工作液,进行图像分析**。
(5):溶解D-Luciferin时要完全。
(6):在图像分析前,将细胞进行37℃的短时间培养可以增加信号强度。
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D-虫荧光素游离酸(D-Luciferin, free acid)、D-虫荧光素钾盐(D-Luciferin, potassium salt)和D-虫荧光素钠盐(D-Luciferin, sodium salt),钾盐、钠盐的形式是最通用的,因为它们都易溶于水。钾盐也是活体动物检测使用的主要形式。它们的激发和发射波长分别为328nm和533nm。