酵母质粒小量提取试剂盒-核酸提取/纯化-分子生物学


英文名称 Yeast Plasmid Extraction Kit

      本试剂盒采用酶法破碎酵母细胞壁和碱裂解法裂解酵母细胞来提取酵母质粒DNA。所采用的酵母破壁酶能有效地破坏酵母细胞壁,提高酵母质粒DNA的产量。吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白质及细胞中其他有机化合物。使用本试剂盒提取的酵母质粒DNA可适用于各种常规的分子生物学实验,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。本试剂盒无需使用酚、氯仿等有毒试剂,操作安全。

注意事项:
      1、溶液YP1在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的RNaseA全部加入),混匀,置于2-8℃保存。
      2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在漂洗液中加入无水乙醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的无水乙醇)。
      3、使用前请先检查溶液YP2和溶液YP3是否出现混浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,待溶液恢复澄清后再使用。
      4、溶液YP2、溶液YP3和漂洗液使用后应立即盖紧盖子,如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机室温下进行离心。
      5、质粒得率与酵母菌株、质粒拷贝数、培养条件等因素有关。通常酵母质粒拷贝数都很低,因此质粒得率一般为每5ml菌液提取1ug左右。
      6、洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul,体积过小会影响回收效率;洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围),pH值低于7.0会降低洗脱效率。