核糖核酸酶H(RNase H)-限制性内切酶-分子生物学


别名 RNA酶H
英文名称 Ribonuclease H
储存条件 -20℃

■ RNase H内容

Ribonuclease H (20~60 U/μl) 600 U

5×Hybrid RNA Degeneration Buffer 300 μl

■ RNase H说明

RNase H是特异性分解RNA-DNA杂交体中的RNA链的核糖核酸内切酶,分子量为21,000,最适pH约为8.0。活性因子为Mg2+或Mn2+。

■ 保存

-20℃。

■ 起源

Escherichia coli HB101 containing rnh plasmid (pKH11) and regulator plasmid (pNT203) ■ 活性定义 以poly(rA)·poly(dT)为底物,在30℃、pH7.7的条件下,20分钟内产生1 nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。

■ 纯度

1.50 U的本酶和1 μg的λ DNA-Hind III分解物在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。 2.50 U的本酶和1 μg的超螺旋pBR322 DNA 在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。 3.50 U的本酶和1 μg的16S,23S rRNA在37℃下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。

■ 用途

1.通过Okayama-Berg法进行cDNA Cloning。

2.DNA-RNA杂交体的检定。

3.在Oligo (dT) 存在下除去mRNA的Poly (A) 末端。

■ 使用注意

本酶由大肠杆菌重组体精制而成,杂质很少,是纯度很高的制品。因此,即便是高浓度制品,大量使用也完全没有问题。