[Promega]AMV Reverse Transcriptase (Promega原装)._PCR试剂/耗材_分子生物学


别名 反转录酶
英文名称 AMV Reverse Transcriptase
储存条件 -20℃
单位

AMV 反转录酶 5×反应缓冲液(M515A):与 AMV 反转录酶一起提供的 5×反应缓冲液的组成为:250mM Tris-HCl(pH8.3 ,25℃),250mM KCl,50mM MgCl2,2.5mM 亚精胺和 50mM DTT。
酶储存液:AMV 反转录酶(AMV-RT)

储存液组成为:200mM 磷酸钾(pH7.2 ,4℃),0.2% Triton X®-100,2mM DTT 和 50% 甘油。
来源:酶纯化于禽成髓细胞瘤病毒颗粒。
储存条件:保存于-20℃。避免反复冻融,切忌暴露于温度频繁变化的环境。请注意查看产品标签上的 过期日期。
活力单位定义:在 37℃下,10 分内催化转化 1nmol 脱氧核苷酸为酸性可沉淀物质所需的酶量即一个活 力单位。反应条件为:50mM Tris-HCl(pH8.3),40mM KCl,8.75mM MgCl2, 10mM DTT,0.1mg/ml 乙酸化的 BSA ,1mM 放射性标记的 dTTP 和 0.25mM poly(A):oligo(dT)。请注意查看产品标签上的活力单位浓度。
注意:

1. AMV 反转录酶 5×缓冲液仅用于 cDNA 第一链的合成,它不含有脱氧核苷酸,因此不能替换 Promega 的 RiboClone AMV RT First-Strand 5×buffer(Part # C121A),C121A 为 Universal RiboClone cDNA System(目录号 C4360)中的一个组份,含有四种 dNTP。Promega 的 Access RT-PCR System(目录 号 A1250)是使用 AMV 反转录酶和 Tfl DNA 聚合酶,把反转录和 PCR 整合为一步而无须中间操作的 试剂盒,其中的缓冲液与 AMV 反转录酶 5×反应缓冲液组份不同,所以这两种缓冲液也是不能互 相替换的。
2. AMV 反转录酶 5×缓冲液不能用于 M-MLV 反转录酶。
3. 如果你将使用Taq DNA Polymerase 于 PCR 反应,那么可以直接加入体积在 10ul 以内的本反转录反 应混合物。如果你使用的是 GoTaq® DNA Polymerase(目录号 M3001)或 PCR Master Mix(目录号 M7501)那么可以直接加入 25ul 以内的本反转录反应混合物于 50ul PCR 体系中。