AAVpro® Helper Free System (AAV-CRE Recombinase)酶试剂盒Takara Clontech | 日本关东化学官网日本柴田科学官网日本天野酶官网

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AAVpro^® Helper Free System (AAV-CRE Recombinase)
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	6668	AAVpro^® Helper Free System (AAV1-CRE Recombinase)	20 μg each	￥8,011
Takara	6652	AAVpro^® Helper Free System (AAV2-CRE Recombinase)	20 μg each	￥8,011
Takara	6653	AAVpro^® Helper Free System (AAV5-CRE Recombinase)	20 μg each	￥8,011
Takara	6654	AAVpro^® Helper Free System (AAV6-CRE Recombinase)	20 μg each	￥8,011

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■ 制品说明

腺相关病毒 (AAV) 是Dependovirus属Parvovirus家族的无包膜病毒。AAV对人无致病性，只有在辅助病毒如腺病毒或疱疹病毒存在下才能复制。AAV基因组是约4.7 kb的单链线状DNA分子，在每个末端都有发夹结构的反向末端重复序列 (ITRs) ，ITRs的功能在于基因组复制起始位点及包装病毒粒子。AAV基因组包含了3个开放阅读框 (图1) ：Rep编码参与复制和转录的蛋白质；Cap编码病毒衣壳蛋白质；AAP编码用于病毒粒子形成的非结构蛋白质。Rep区域编码4种不同的蛋白质 (Rep78, Rep68, Rep52和Rep40) ，Cap区域编码3种不同的蛋白质 (VP1, VP2和VP3) 。
AAV有100多种血清型，不同血清型病毒间的宿主特异性和特点有所不同。Takara Bio Inc.提供AAV 1型 (AAV1) 、2型 (AAV2) 、5型 (AAV5) 、6型 (AAV6) 的制备试剂盒。2型 (AAV2) 具有广泛的研究应用，包括基因治疗，也具备泛嗜性特点。而AAV1、AAV5和AAV6却受限于组织宿主。AAV1对于肌肉、肝脏、呼吸道和中枢神经系统有高转导效率；AAV5对于中枢神经系统、肝脏和视网膜有高转导效率；AAV6对于心肌细胞、肌肉和肝脏有高转导效率。
腺相关病毒载体 (AAV载体) 能够转导基因进入细胞和生物体，可用作研究工具和基因治疗的载体。另外，AAV载体较腺病毒载体和逆转录病毒载体更安全。AAV载体能用于转导基因进入增殖和非增殖细胞，以及在未分裂细胞内的长期表达，AAV很少有免疫原性，非常适用于转导基因进入动物体内 (作为体内转导工具) 。
本制品制备的AAV病毒可传递Cre基因编码的loxP依赖型重组酶。Cre重组酶已经广泛用于制备转基因小鼠和各种筛选检测。

AAVpro® Helper Free System (AAV-CRE Recombinase)

图1.
使用AAVpro Helper Free System (AAV2-CRE Recombinase) (Code No. 6652)制备 AAV2-Cre病毒，并使用AAVpro Purification Kit (AAV2) (Code No. 6232)纯化该病毒。以100 vg/cell或者12,500 vg/cell AAV2-Cre病毒粒子感染表达loxP-ZsGreen1的HEK293 细胞，采用流式细胞术分析实验结果。实验结果表明，随着感染细胞时所采用的AAV2-Cre病毒粒子数量的增加，表达ZsGreen1的细胞比例也随之增加。

■ 制品特点

使用AAV Helper Free System制备AAV病毒
AAV Helper Free System是一种特别的可制备高滴度AAV的无辅助病毒系统 (图2) 。试剂盒包含3种质粒，只需将制备AAV病毒所需的这3种载体质粒转染于HEK293细胞中，即可制备AAV病毒。
·pRC2-mi342 Vector：包含AAV2的Rep基因和Cap基因
*pRC2-mi342可表达hsa-miR-342，hsa-miR-342是一种病毒制备系统中可提高病毒滴度的人源miRNA。与一般只表达Rep基因和Cap基因的pRC2 Vector相比，病毒滴度可提高2倍。
·pHelper Vector：包含腺病毒的E2A、E4和VA基因的载体质粒。
·pAAV-CRE Recombinase Vector：
包含目的基因表达启动子和2个ITR的载体质粒。本载体制备的AAV病毒可传递Cre基因编码的loxP依赖型重组酶。Cre重组酶已经广泛用于制备转基因小鼠和各种筛选检测。

图2.使用AAVpro Helper Free System 制备AAV病毒

■ 制品内容

AAVpro^® Helper Free System (AAV1-CRE Recombinase) （Code No. 6668）

pAAV-CRE Recombinase Vector (1 μg/μl)	20 μl
pRC1 Vector (1 μg/μl)	20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl)	20 μl
AAV Extraction Solution A	1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B	150 μl×3

Limited Use Label License: [M84]

AAVpro^® Helper Free System (AAV2-CRE Recombinase) （Code No. 6652）

pAAV-CRE Recombinase Vector (1 μg/μl)	20 μl
pRC2-mi342 Vector (1 μg/μl)	20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl)	20 μl
AAV Extraction Solution A	1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B	150 μl×3

Limited Use Label License: [M83], [M84]

AAVpro^® Helper Free System (AAV5-CRE Recombinase) （Code No. 6653）

pAAV-CRE Recombinase Vector (1 μg/μl)	20 μl
pRC5 Vector (1 μg/μl)	20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl)	20 μl
AAV Extraction Solution A	1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B	150 μl×3

Limited Use Label License: [M84]

AAVpro^® Helper Free System (AAV6-CRE Recombinase) （Code No. 6654）

pAAV-CRE Recombinase Vector (1 μg/μl)	20 μl
pRC6 Vector (1 μg/μl)	20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl)	20 μl
AAV Extraction Solution A	1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B	150 μl×3

Limited Use Label License: [M84]

■ 各载体序列

zip压缩形式，点击查看：
· pAAV-LacZ（fasta data）
· pHelper（fasta data）
· pRC1（fasta data）
· pRC5（fasta data）
· pRC6（fasta data）
· pRC2-mi342（fasta data）

■ 保存

-20℃。
AAV Extraction Solution A 和AAV Extraction Solution B融解后，请于室温保存。