HiScribe™ T7 mRNA 合成试剂盒（含 CleanCap® Reagent AG） 货 号 #E2080S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

HiScribe™ T7 mRNA 合成试剂盒（含 CleanCap® Reagent AG）                              收藏

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#E2080S
20 次反应
7,079.00
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产品特点

·使用 1 µg 对照模板，单次反应可转录高达 90 µg Cap-1 mRNA

·独立包装的 NTP 适用于全部/部分修饰 NTPs 替换
·试剂盒包含模板去除和 RNA 纯化试剂
·试剂盒包含线性对照模板，用于验证 CleanCap® Reagent AG 的 RNA 合成效果

产品概述

 对于大多数真核生物来说，mRNA 需要 5’端带有 7-甲基鸟苷（m7G）帽结构，3’端带有 poly（A）尾才能有效翻译。HiScribe™ T7 mRNA合成试剂盒（含 CleanCap® Reagent AG）优化了 RNA 合成配方，利用三核苷酸帽结构类似物技术，通过一步共转录加帽即可获得带有天然的 Cap-1 结构的 mRNA，且不会影响 RNA 产量。使用含 T7 启动子序列、AG 起始的目标序列和 poly（A）尾编码序列的 DNA 模板，即可转录带有 5’-m7G Cap-1 和 poly（A）尾的 mRNA，该 mRNA 能够有效翻译并能逃避细胞先天免疫反应。

 
HiScribe™ T7 mRNA合成试剂盒（含 CleanCap® Reagent AG）包含独立包装的 NTP 和 CleanCap Reagent AG，适用于全部/部分修饰 NTPs 替换，试剂盒总产量为 1.8 mg mRNA。使用该试剂盒合成的 Cap-1 mRNA 适用于多种应用，包括：转染、显微注射、体外翻译、临床前 mRNA 治疗研究以及 RNA 结构和功能分析。
 
该试剂盒可完成 20 次共转录反应（20 μl 体系）。使用 1 μg CLuc AG 对照模板 DNA 进行标准反应，可转录≥90 μg RNA。每个试剂盒的产量≥1.8 mg RNA。
 
图 1：CleanCap Reagent AG 分子结构
 
HiScribe™ T7 mRNA 合成试剂盒（含 CleanCap® Reagent AG） 货 号 #E2080S
图 2：使用 CleanCap Reagent AG 时，启动子和起始序列示意图
 
HiScribe™ T7 mRNA 合成试剂盒（含 CleanCap® Reagent AG） 货 号 #E2080S
 

图 3：CleanCap Reagent AG 比 ARCA 的mRNA 合成产量更高

HiScribe™ T7 mRNA 合成试剂盒（含 CleanCap® Reagent AG） 货 号 #E2080S

所有反应均使用 5 mM CTP、5 mM UTP 和 6 mM ATP 进行。标准 IVT 反应使用 5 mM GTP，不添加帽结构类似物。ARCA 反应使用 4：1 的 ARCA：GTP（4 mM：1 mM）。含 CleanCap Reagent AG 的 IVT 反应使用 5 mM GTP 和 4 mM CleanCap Reagent AG，反应体系分别参照以下说明书配制：标准 mRNA 合成和 HiScribe T7 mRNA合成试剂盒（含 CleanCap Reagent AG））。反应在 37℃ 下孵育 2 小时，通过 NanoDrop 检测纯度和定量。