多聚ADP-核糖基化修饰[PARylation：Poly(ADP-ribosyl)ation]

一种重要的翻译后修饰

图：多聚ADP-核糖基化修饰和PAR去除的原理示意图（源自N.J. Curtin & C. Szabo; Nat. Rev. Drug Discov. 19, 711 (2020)）

多聚ADP-核糖基化修饰[PARylation：Poly(ADP-ribosyl)ation]，是一种翻译后修饰过程（类似于磷酸化、甲基化或乙酰化等修饰），通过该过程，ADP-核糖的聚合物（ADP-核糖残基在2~200或以上的pADPr或PAR）可利用PAR聚合酶（PARP）酶共价结合至核蛋白上。多聚ADP-核糖基化的翻译后修饰[PARylation：Poly(ADP-ribosyl)ation]在细胞生理学和应激反应中发挥着重要的作用。这种修饰由多聚ADP-核糖聚合酶（PARPs，也称为ARTDs）的家族成员进行催化。它还参与许多生物学进程，包括基因组稳定性维持、DNA损伤反应、DNA修复、复制和转录、染色质重塑、应激反应、细胞代谢和细胞死亡的调控。此外，PARPs在癌症治疗中是具有应用潜力的靶点，可作为化疗增敏剂与传统的DNA损伤化疗结合使用，也可以单独作为药物应用于缺乏同源重组的肿瘤。

◆多聚ADP-核糖聚合酶（PARPs）

多聚ADP-核糖（PAR）对核蛋白的翻译后修饰，主要由多聚ADP-核糖聚合酶1（PARP-1/ARTD1）催化，少部分以NAD⁺为底物，由其他的多聚ADP-核糖聚合酶进行催化。PARP-1是一种高含量且高度保守的、呈组成性表达的蛋白。然而，其催化活性主要取决于DNA单链或双链断裂的出现，这种断裂的出现可以被该酶的DNA结合结构域中的两个锌指所识别。

PARP-1被DNA链断裂选择性激活后，会催化PAR的长支链添加至各种核蛋白上，尤其是PARP自身。在DNA损伤的活细胞所形成的PAR量与细胞损伤程度相称。在DNA损伤的条件下，PAR会发生急剧的衰变，半衰期只有几分钟，这是因为PAR被多聚ADP-核糖水解酶（PARG）迅速水解并转化为游离的ADP-核糖。

除自动修饰的PARP-1外，还有许多蛋白已被认定为多聚ADP-核糖基化修饰的靶蛋白（受体），其中包括染色质-结构蛋白DEK。更重要的是，已表明PAR是以非共价但特异性的方式与多种蛋白质结合的。PAR这种非共价结合与特异性结合的蛋白（即XPA、p53、WRN）之间有着高亲和力（nM级），其同时取决于PAR链长和结合蛋白，表明其中存在着一种“PAR代码”。

如上所述，PAR不仅参与调节细胞存活和细胞死亡的程序，还被发现可以调节与PARP家族新成员相关的越来越多的其他生物学进程，包括转录调节、细胞分裂、细胞内运输、炎症和能量代谢等进程。

参考文献：

1.	Functions of PARylation in DNA Damage Repair Pathways: H. Wei & X. Yu; Gen. Prot. Bioinform. 14, 131 (2016)
2.	In Vivo Level of Poly(ADP-ribose): M. Miwa, et al.; Challenges 9, 23 (2018)
3.	The Enigmatic Function of PARP1: From PARylation Activity to PAR Readers: T. Kamaletdinova, et al.; Cells 8, 1625 (2019)
4.	Novel insights into PARPs in gene expression: regulation of RNA metabolism: Y. Ke, et al.; Cell. Mol. Life Sci. 76, 3283 (2019)
5.	Poly(ADP-Ribose) Glycohydrolase (PARG) vs. Poly(ADP-Ribose) Polymerase (PARP) – Function in Genome Maintenance and Relevance of Inhibitors for Anti-cancer Therapy: D. Harrision, et al.; Front. Mol. Biosci. 7, 191 (2020)
6.	Poly(ADP- ribose) polymerase inhibition: past, present and future: N.J. Curtin & C. Szabo; Nat. Rev. Drug Discov. 19, 711 (2020)

◆用于PAR & PARP研究的高质量试剂

标准抗体：抗多聚ADP-核糖[PAR]，mAb（10H）

可提供批量包装的产品！

在PARP领域具有新进展的大部分研究，特别是与酶的催化活性相关的，都是得益于新型ADP核糖检测试剂的开发。几十年来，这个领域一直依赖于抗PAR单抗（产品编号：AG-20T-0001），这种单克隆抗体可以与长度超过10个ADP核糖单位的PAR链结合，甚至可以在完整细胞水平上通过免疫荧光对多聚ADP-核糖（PAR）可视化。因此，这种抗PAR（10H）抗体被认为是多聚ADP-核糖基化修饰领域的标准抗体，并已刊登于数百种出版物中。这种抗体目前已应用于western blot、免疫组化、免疫细胞化学和流式细胞术的研究中。该抗体可以识别由多种PARP多聚ADP-核糖聚合酶合成的多聚ADP-核糖，如人、小鼠、大鼠或果蝇的PARP酶。

多聚ADP-核糖基化修饰[PARylation：Poly(ADP-ribosyl)ation]

图：使用了抗PAR（10H）的典型western blot图。该图显示U937细胞对H₂O₂有着剂量依赖性，且使用H₂O₂诱导多聚ADP-核糖基化（PARP-1激

图：活），在10 min时检测到的PARP-1激活阈值为200 mM。根据对照泳道，表明PARP-1和PKA在相同实验条件下的蛋白水平不变。

图：（A. Brunyanszki, et al.; Mol. Pharmacol. 86, 450 (2014)）

◆产品列表

高活性PARPs＆PARG

产品编号	产品名称	包装	产品描述
AG-40T-0010	PARP-1 [ARTD1] (catalytic domain) (human) (rec.) (His) 重组人PARP-1 [ARTD1]（催化结构域）（His标签）	20 µg	人PARP-1 [ARTD1]（aa 656-1014）与MYC 和His-tag结合。在Sf21细胞中产生。活性：形成多聚ADP-核糖需要约50 ng。
AG-40T-0011	PARP-1 [ARTD1] (human) (rec.) (His) (high purity) 重组人PARP-1 [ARTD1]（His标签）（高纯度）	10 µg	人全长PARP-1 [ARTD1]与MYC和His-tag结合。在Sf21细胞中产生。活性：≥1200 U/mg 蛋白。
AG-40T-0012	PARP-2 [ARTD2] (mouse) (rec.) (His) (high purity) 重组人PARP-2 [ARTD2]（His标签）（高纯度）	10 µg	小鼠全长PARP-2[ARTD2]与His-tag结合。在 Sf21细胞中产生。活性：≥600 U/mg蛋白。
AG-40T-0013	PARP-3 [ARTD3] (human) (rec.) (His) (high purity) 重组人PARP-3 [ARTD3]（His标签）（高纯度）	10 µg	人全长PARP-3[ARTD3]与HA-tag和His-tag结合。在Sf21细胞中产生。活性：10 U/mg蛋白（仅指单ADP-核糖基转移酶活性）。
AG-40T-0015	PARP-1[ARTD1](E988K Mutant) (human) (rec.) Control 重组人PARP-1 [ARTD1]（E988K 突变）对照	10 µg	人全长PARP-1的失活突变E988K与HA-tag和 His-tag结合。在Sf21细胞中产生。活性：野生型PARP-1的0.5%。
AG-40T-0022	PARG (human) (rec.) (His) (highly active) 重组人PARG（His标签）（高活性）	2 µg	人PARG与His-tag结合。在Sf21细胞中产生。活性：多聚ADP-核糖的降解实验需要约100 ng。

特异性PARP抗体

产品编号	产品名称	包装	产品描述
AG-25T-0001	anti-PARP-1 [ARTD1] (mouse), pAb 抗小鼠聚ADP核糖聚合酶-1[ARTD1]多抗	100 µL	可识别小鼠PARP-1[ARTD1]。与人PARP-1的交叉反应较弱。适用于ICC、IHC、IP和 Western blot。
AG-25T-0002	anti-PARP-1 [ARTD1] (human), pAb 抗人聚ADP核糖聚合酶-1[ARTD1]多抗	100 µL	可识别人PARP-1[ARTD1]。与小鼠、猴PARP- 1的交叉反应较弱。适用于ICC、IHC、IP和 Western blot。
AG-25T-0003	anti-PARP-2 [ARTD2] (mouse), pAb 抗小鼠聚ADP核糖聚合酶-2[ARTD2]多抗	100 µL	可识别小鼠PARP-2[ARTD2]。与人PARP-2的交叉反应较弱。适用于ICC、IHC、IP和 Western blot。
AG-20T-0004	anti-PARP-10 [ARTD10] (human), mAb (5H11) 抗人PARP-10 [ARTD10]单抗（5H11）	1 mL	可识别抗原表位在aa 256-407之间的，包含甘氨酸富集区的人PARP-10 [ARTD10]。适用于ICC、IP和Western blot。

PARPs＆PARG的小分子调节剂

产品编号	产品名称	包装	产品描述
SYN-1190	AS-703026	1 mg	具有选择性、非竞争性和口服生物有效性的 MEK1/2抑制剂，可通过caspase-3和PARP裂解在多发性骨髓瘤细胞中诱导凋亡。
		5 mg
		10 mg
		50 mg
		100 mg
SYN-3046	AZ9482	1 mg	强效和选择性PARP抑制剂（PARP- 1、-2、-3、-6，TNKS1/PARP-5a和TNKS2对应的IC₅₀分别为1、1、46、640、9和160 nM）。
		5 mg
		10 mg
		50 mg
		100 mg
BVT-0079	Benadrostin	500 µg	稀有的天然PARP抑制剂（IC50=35 μM）。
		1 mg
AG-CR1-0037	DPQ	1 mg	细胞渗透性强、有效的PARP-1抑制剂（IC₅₀= 40 nM）。对PARP-2的效力比PARP-1低10倍左右。
		5 mg
AG-CR1-3706	GeA-69	1 mg	针对多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶14（PARP-14 M2）（Kd=0.86 µM）的macrodomain结构域2的强效和选择性变构抑制剂。PARP-14是一种与炎症性疾病和多种癌症相关的抗凋亡促活蛋白。
AG-CN2-0481	Genipin 京尼平	25 mg	诱导PARP裂解和诱导由caspase-3-、 caspase-9介导的细胞凋亡。
		100 mg
		500 mg
AG-CR1-0024	1,5-Isoquinolinediol 1,5-异喹啉二醇	5 mg	细胞渗透性强、有效的PARP-1抑制剂（IC₅₀=0.39 μM）。
		25 mg
		100 mg
AG-CR1-3581	IWR-1-endo Wnt抑制剂	5 mg	细胞渗透性强的Tankyrase-1/PARP- 5a（IC₅₀=131 nM）和Tankyrase-2/PARP- 5b（IC₅₀=56 nM）抑制剂（体外自 PARylation研究）。
		25 mg
CDX-M0565	MK-4827 tosylate MK-4827甲苯磺酸盐	10 mg	PARP-1和PARP-2的口服生物有效性抑制剂（IC₅₀分别为3.8、2.1 nM）。
		50 mg
CDX-O0144	Olaparib 奥拉帕尼	100 mg	细胞渗透性强的PARP-1和PARP-2的有效抑制剂（IC₅₀分别为5、1 nM）。抗Tankyrase- 1/PARP-5a的效果较弱（IC₅₀=1.5 μM）。
		1 g
AG-CR1-0100	PJ-34 PARP抑制剂	1 mg	细胞渗透性强的水溶性PARPs有效抑制剂（EC₅₀ = 20 nM）。能结合并抑制 Tankyrase-1/PARP-5a（IC₅₀=1 μM）。
		5 mg
		25 mg
AG-CR1-3646	PARG Inhibitor PDD00017273 聚（ADP-核糖）糖水解酶(PARG)抑制剂PDD00017273	1 mg	有效的PARG抑制剂。抑制人重组PARG酶（IC₅₀=26 nM）以及用于细胞研究（IC₅₀=37 nM）。对ARH3和PARP-1s无活性（IC₅₀>30 µM）。
		5 mg

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