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csr-syn01-cos
"α-突触核蛋白聚集检测试剂盒
(ALPHA)-Synuclein Aggregation Assay Kitα-突触核蛋白聚集检测试剂盒模拟在路易体痴呆、帕金森病、多系统萎缩中发现的细胞内α-突触核蛋白聚集。
本试剂盒可用于在细胞培养水平上，检测目标活性物质对细胞聚集的抑制和/或预防作用。
◆背景
痴呆症是导致记忆和辨别能力退化的疾病，还没有根治的方法。经过多年的科学研究证实，许多神经变性病（包括痴呆症）的大脑退化部位会发生蛋白凝聚，表明这种聚集的出现与这些疾病的发生和发展密切相关。
正常蛋白形式因特定原因形成异常结构并在细胞中积累时，会发生蛋白聚集，每种疾病有不同的聚集蛋白。目前已知在帕金森病、路易体痴呆、多系统萎缩病人脑内，α-突触核蛋白结构形成异常结构。
α-突触核蛋白聚集检测试剂盒模拟细胞内“α-突触核蛋白”的聚集情况，可用于在体外筛选活性成分。
◆试剂盒组成
组成 容量 规格 保存 pCMV-SNCA (α – Synuclein 表达质粒, 红盖)
(浓度1.25 μg/μL)32 μL 1 小瓶 4°C
不冻结pCMV-NC(阴性对照, 绿盖)
(浓度1.25 μg/μL)5 μL 1 小瓶 pCMV-dGFP(dGFP 表达质粒, 蓝盖)
(浓度1.25 μg/μL)5 μL 1 小瓶 20 mM Tris-HCl Buffer (pH 7.4) 10 mL 1 瓶 F-αSyn (α – Synuclein 纤维, 黄盖)
(浓度1 μg/μL)32 μL 1 小瓶 Multifectam (基因转染试剂) 0.33 mg 1 瓶 ◆检测流程
◆实例
一 免疫印迹法Western blotting (使用各种突触核蛋白抗体)
1、除去培养基。
2、每个孔添加 1 mL PBS, 用移液器收集细胞。
3、离心 (4,500 rpm [1,800 x g], 5 分钟,室温), 收集沉淀。
4、添加 0.1 mL 裂解缓冲液(10 mM Tris-HCl, pH 7.5 含 0.8 M NaCl, 1 mM乙二醇双（2-胺基乙基醚）-
N，N，N，N-四乙酸 (EGTA), 1 mM DTT 和 1% N-月桂酰肌氨酸钠), 超声波混合。
5、离心 (50,000 rpm [100,000 x g], 20 分钟, 室温)。
6、添加 40 µL 2 x SDS Buffer (0.125 M Tris-HCl pH6.8, 200 mM 1,4二硫苏糖醇(DTT), 4% 十二烷基硫酸钠
(SDS) , 10%蔗糖, 0.01% BPB) 至颗粒中,超声波混合, 加热 (100 °C,5 分钟), 进行 10 µL/well 的免疫印迹。
突触核蛋白抗体详情请点击此处
二 淀粉样蛋白/物质荧光染色试剂盒
使用淀粉样蛋白/物质荧光染色试剂盒(Cosmo Bio,产品编号：CSR-SYN02-COS)，可对已发生聚集的α-突触核蛋白和核仁进行双重染色。
阴性对照载体（pCMV-NC）
相位图 核染色 突触核蛋白聚集 使用α-突触核蛋白（pCMV-SNCA+F-α Syn）
相位图 核染色 突触核蛋白聚集 仅用于研究。不得用于人类基因治疗或临床诊断。
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