CYTO-ID^® Autophagy Detection Kit使用新型染料检测自噬小泡和监控活细胞自噬流，选择性标记积累的自噬小泡。染料已通过优化，不染溶酶体，在自噬前体、自噬体和自噬溶酶体里呈现出明 亮的荧光。该试剂盒提供了一种无需细胞转染，可以在活细胞中监控细胞自噬的快速定量方法。

CYTO-ID^® Autophagy Detection Kit
 

　　胞内物质被扩大的膜囊包裹，吞噬泡形成双层膜囊泡，成为自噬体。自噬体外膜随后与溶酶体融合，和内部物质被自噬性溶酶体降解。自噬的各种调节因子也被描绘于图中。

自噬原理图

省时省力，无需转染即可自快速全面的标记自噬小泡

　　为了演示CYTO-ID^® Green detection reagent的优势，先用RFP-LC3表达载体转染HeLa细胞， 10μM的Tamoxifen处理过夜，然后用CYTO-ID^® 绿色检测试剂染色。LC3转染法需要过夜，而CYTO-ID^® 绿色检测试剂的方法在15-30分钟内标记细胞达100％。图A：绿信号显示自噬小泡的CYTO-ID^® 绿染;图B：成功转染细胞的RFP-LC3表达（红色）;图C：自噬体的特异性标记LC3，与CYTO-ID^® 绿色染料标记的小泡共定位的复合图像。

的发放

无转染的自噬检测

　　Hela细胞进行饥饿与恢复，然后使用CYTO-ID^® Green detection reagent标记。染料可以明确检测和量化自噬及与自噬诱导相关的自噬小泡前体。图1A：稳定表达GFP-LC3的CHO细胞，结果显示对照组与饥饿的细胞群的相对较差的基线分离，自噬难以量化。图1B：CYTO-ID^® Autophagy Detection Kit特异性标记LC3蛋白依赖的自噬小泡，免去转染操作。

自噬积累和自噬流的可视化

　　可用荧光显微镜观察CYTO-ID^® 自噬绿色染料检测的自噬液泡积累和自噬流。Hela细胞用以下试剂进行模拟诱导，0.2% DMSO（A）和100μM  Clonidine hydrochloride（B）进行诱导，5μM Loperamide hydrochloride和1 μM PP242 hydrate（D）在37°C诱导12小时。处理后，细胞在37℃下用CYTO-ID^® Green Detection reagent孵育10分钟，再用分析缓冲液清洗。细胞核被Hoechst 33342染料复染为蓝色。

避免非特异性溶酶体染色的背景干扰

　　相比其他MDC染色溶酶体检测，CYTO-ID^® 绿色染料无溶酶体染色背景，CYTO-ID^® Autophagy kit无需紫外活细胞分析，在显微镜共标记应用中，与Hoechst染料兼容。

使用流式细胞仪通过CYTO-ID^® Autophagy Detection Kit分析自噬

　　对照组（红线峰值）无诱导，10 uM Tamoxifen (ALX-550-095)处理Jurkat细胞（白血病T细胞）（蓝线峰值）。处理18小时后，细胞结合CYTO-ID^® 绿色检测试剂，然后不经过流式细胞仪清洗，进行分析。结果通过直方图呈现。对照组细胞被染色，但荧光亮度低。实验组中，CYTO-ID^® 绿色荧光信号增加约2倍，表明Tamoxifen处理能引起Jurkat细胞中自噬的增加。

　　使用mTOR激酶抑制剂Rapamycin处理HepG2细胞孵育过夜，结果显示CYTO-ID^® 染色信号升高。

CYTO-ID^® 绿色染料大多与RFP-LC3蛋白共定位。0.1μM Rapamycin（典型自噬诱导剂）处理过夜，转染Hela细胞表达RFP-LC3。A: CYTO-ID^® Green染色； B: RFP-LC3； C: 合成图像。

产品编号

产品名称

规格

备注

应用

ENZ-51002-25

GFP-Certified®Apoptosis/Necrosis detection kit

细胞凋亡/坏死检测试剂盒

25 assays

多重检测，区分正常、

早期凋亡、晚期凋亡和坏死细胞，与GFP和其他绿色荧光探针兼容。

FC，荧光显微镜，荧光检测

ENZ-51002-100

100 assays

ENZ-51021-K200

Nuclear-ID®Green

hromatin condensation detection kit

细胞核绿色染色体皱缩检测试剂盒

1 Ki

高渗透性的绿色荧光染色增强了细胞凋亡诱导染色质固缩。

FC，荧光显微镜，荧光检测

ENZ-52406

NUCLEAR-ID^®Red DNA stain

DNA染色试剂盒（红色荧光）

200 µl

细胞可渗透的DNA染色应用广泛。

≥93％（HPLC），FC，荧光检测

ENZ-CHM103-0200

Nuclear-ID®Blue

DNA stain   (GFP-Certified®)

Nuclear   ID®蓝色DNA染色（GFP细胞系）

200 µ

细胞可渗透的DNA染色应用广泛。

≥93％（HPLC），FC，荧光检测

ENZ-51015-KP002

Lyso-ID®Red

cytotoxicity kit   (GFP-Certified®)

溶酶体细胞毒理检测试剂盒（红色荧光）（绿色细胞系）

1 Kit

快速，定量和HTS-兼容的检测活细胞毒性试剂。

荧光显微镜，荧光检测

ENZ-51035-0025

ProteoStat®Aggresome   etection kit

蛋白内稳态® 聚集体 检测 试剂盒

25 tests

Robust、定量的聚集小体用于神经退行性疾病，肝病和毒理学研究

FC，荧光显微镜，荧光检测

ENZ-51035-K100

100 tests