重组双碱性氨基酸内肽酶（RKex2）

◆概述

Kex-2（E.C.3.4.21.61）属于枯草杆菌蛋白酶家族，为酵母自身编码的一种前体加工酶，Ca²⁺ 依赖型丝氨酸蛋白酶，能够专一性地识别和切割Lys-Arg，Arg-Arg，Pro-Arg等双碱性氨基酸^※ 的羧基端肽键。不同于Trypsin，该酶不能识别和切割单一碱性氨基酸（Arg或Lys）的羧基端肽键。常在酵母表达外源蛋白前体中加入Kex-2识别位点，便于外源蛋白前体加工。该酶最适pH为9.0，在偏酸性环境中稳定，稳定pH为5.0-6.0。最适温度为37 ℃，酶活性不受常规丝氨酸蛋白酶抑制剂（如PMSF、TPCK等）抑制。

※碱性氨基酸：水解生成的氢氧根负离子多于氢正离子的氨基酸，其特点是侧链常含有可质子化的碱性化学基团。包括以下三种：

◆优势

●　单批次产量大，批间差小

●　高纯度，高比活性

●　无外源性病毒污染，无动物源生产原料

◆纯度

SDS-PAGE显示纯度>90%。

◆使用方法

溶解缓冲：20 mmol/L NaAc-HAc，2 mmol/L Ca²⁺，pH 5.0~5.5。

酶切体系：50~100 mmol/L Tris，2 mmol/L Ca²⁺，pH 7.0~9.0；或HEPES，5 mmol/L  Ca²⁺，pH 7.0~9.0；

推荐使用量：蛋白酶：融合蛋白质量比1：20~1：1000

◆保存条件

储存稳定性：冻干粉存于-15 ℃以下，24个月稳定；20 mmol/L NaAc-HAc，2 mmol/L Ca²⁺，

储存稳定性：pH 5.0~5.5溶解后分装储存于-15 ℃以下，避免反复冻融；溶解后2~8 ℃保存建议不超过24 h。

运输稳定性：冰袋保温运输，活性稳定。

◆应用实例

RKex-2特异性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKR及LWK，蛋白酶：合成多肽质量比1：1000，37 ℃酶切反应10 min，LC-MS验证酶切反应特异性。

◆产品信息

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