磷酸化蛋白提取——Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法
Phos-tag™是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子。
磷酸化蛋白提取
Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法！
Phos-tag™是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子。它可用于磷酸化蛋白的分离（Phos-tag™ Acrylamide）、Western Blot检测（Phos-tag™ Biotin）、蛋白纯化 （Phos-tag™Agarose）及质谱分析MALDI-TOF/MS （Phos-tag™ Mass Analytical Kit）。
◆Phos-tag™ 的基本结构：
特点：
与-2价磷酸根离子的亲和性和选择性高于其它阴离子
在pH 5-8的生理环境下生成稳定的复合物
◆原理：
◆应用：
样品类型
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样品类型 |
纯化蛋白、组织均浆液、组织裂解液、体外酶反应液 |
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样品来源物种 |
无物种特异性，可用于人、植物（拟南芥 水稻 棉花等）、动物（斑马鱼 灵长类等）、微生物(酵母 细菌 真菌等） 昆虫（果蝇 蚕等） |
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分离蛋白大小 |
磷酸化蛋白的分离范围在十几到220kDa，文献报道可分离350kDa的磷酸化蛋白 |
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准备的试剂和仪器 |
10mM的MnCl2溶液，固体产品需要溶解于甲醇中,其余与常规SDS-PAGE相同 |
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各包装可做实验次数 |
2mg包装20μM可制约20块胶，50μM约8块；10mg包装20μM可制100块胶，50μM约40块 |
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凝胶染色 |
考马斯亮蓝、银染、荧光染色、阴性染色 |
相关产品：
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产品名称 |
用 途 |
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Phos-tag™ Acrylamide |
分离: SDS – PAGE 分离不同磷酸化水平的蛋白 |
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SuperSep Phos-tag™ |
分离: 预制胶中含有50μM Phos-tag™ Acrylamide |
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Phos-tag™ Biotin |
检测: 代替 Western Blot 检测中的磷酸化抗体 |
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Phos-tag™ Agarose |
纯化: 通用柱层析，纯化磷酸化蛋白 |
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Phos-tag™ Mass Analytical Kit |
分析: 用于质谱 MALDI-TOF/MS 分析，提高磷酸化分子的检测灵敏度 |
Phos-tag Acrylamide（丙烯酰胺）
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产品编号 |
生产商编号 |
产品名称 |
规格 |
Phos-tag在配制胶中的浓度 |
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20μM |
50μM |
100μM |
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304-93526 |
AAL-107S1 |
Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution |
0.3mL |
约10块 |
约4块 |
约2块 |
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300-93523 |
AAL-107M |
Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 |
2mg |
约20块 |
约8块 |
约4块 |
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304-93521 |
AAL-107 |
Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 |
10mg |
约100块 |
约40块 |
约20块 |
SuperSep Phos-tag™ （丙烯酰胺预制胶）
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产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
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193-16711 |
SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13 well |
5块 |
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190-16721 |
SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 17 well |
5块 |
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195-16391 |
SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 13 well |
5块 |
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193-16571 |
SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well |
5块 |
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193-16691 |
SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13 well |
5块 |
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196-16701 |
SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 17 well |
5块 |
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197-16851 |
SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 13 well |
5块 |
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194-16861 |
SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 17 well |
5块 |
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198-17981 |
SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm |
5块 |
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195-17991 |
SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm |
5块 |
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192-18001 |
SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm |
5块 |
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199-18011 |
SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm |
5块 |
Phos-tag™ Biotin（生物素）
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产品编号 |
生产商编号 |
产品名称 |
规格 |
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301-93531 |
BTL-104 |
Phos-tag™ Biotin BTL-104 |
10mg |
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308-97201 |
BTL-111S1 |
Phos-tag Biotin BTL-111 1mM Aqueous Solution |
0.1ml |
Phos-tag™ Agarose（琼脂糖）
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产品编号 |
生产商编号 |
产品名称 |
规格 |
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302-93561 |
AG-501 |
Phos-tag™ Agarose |
0.5ml |
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308-93563 |
AG-503 |
Phos-tag™ Agarose |
3ml |
Phos-tag™ Mass Analytical Kit（质谱分析试剂盒）
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产品编号 |
生产商编号 |
产品名称 |
规格 |
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305-93551 |
MS-101KIT |
Phos-tag™ Mass Analytical Kit |
1 set |
SuperSep Phos-tag™预制胶即开即用！
phos-tag™由日本广岛大学研究生院医齿药学综合研究科医药分子功能科学研究室开发。
SuperSep Phos-tag™是一种预制胶，预先加入了50 μmol/L的Phos-tag™ Acrylamide，打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子，在中性凝胶缓冲液中保存稳定性很好，得到的结果条带也很整齐。
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板大小 |
100 x 100 x 3 (mm) |
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凝胶大小 |
90 x 85 x 1 (mm) |
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孔数 |
13 |
17 |
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孔容积 |
30 μL |
25 μL |
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Phos-tag™浓度 |
50 μmol/L |
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丙烯酰胺浓度 |
10%、12.5%、15% 和17% |
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ZnCl2浓度 |
100 μmol/L |
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优点、特色：
u 即开即用。
u 预制胶使用安全。
u 可长期保存（6个月）。
u 操作与普通SDS-PAGE一样。
◆案例、应用：
电泳条件：30 mA（恒电流）, 60分钟
样品：5 ug/Lane α–酪蛋白（含磷酸化与去磷酸化α–酪蛋白）（产品编号038-23221）
普通SDS-PAGE只观察到一条条带，而Phos-tag™ SDS-PAGE里可见α-酪蛋白磷酸化和α-酪蛋白去磷酸化两条
条带。
样品缓冲液：Sample Buffer Solution (2ME+) (X4) (产品编号191-13272)
电泳缓冲液：SDS-PAGE 缓冲液, pH8.5(产品编号192-16801)
染色：QUICK CBB PLUS(产品编号174-00553)
P10%(左) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13well
P15%(中) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13well
A15%(右) : SuperSep™Ace, 15%, 13well （不含Phos-tag™）
◆相关产品：
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产品编号 |
产品名称 |
规 格 |
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058-07681 |
EasySeparator <配套电泳槽> |
1 套 |
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230-02461 |
Wide-View Prestained Protein Size Marker III (11~245kDa) |
500 μL (200 次) |
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038-23221 |
α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated |
1 mg |