亲和性标签抗体结合琼脂糖珠 重组蛋白纯化用


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亲和性标签抗体结合琼脂糖珠                              重组蛋白纯化用

重组蛋白纯化用

亲和性标签抗体结合琼脂糖珠

亲和性标签抗体结合琼脂糖珠                              重组蛋白纯化用

亲和性标签抗体结合琼脂糖珠                              重组蛋白纯化用

◆亲和性标签抗体结合琼脂糖珠


亲和性标签抗体结合琼脂糖珠                              重组蛋白纯化用

可确认比A公司产品具有同等甚至以上的抗原回收性能!!

<使用载体量>
抗DYKDDDDK标签抗体琼脂糖珠(Wako): 20 μL / assay
A社 Affinity Beads: 20 μL /assay
<抗原添加量>
含DYKDDDDK标签融合蛋白的大肠杆菌细胞溶解液20 mg/assay
<免疫沉淀条件>
4℃、3 小时
<洗脱方法>
150 μg/mL DYKDDDDK肽 (产品编号:
044-30951) 20 μL /assay
→ 4℃、孵化30 分钟
添加20 μL / assay 的2%SDS sample buffer → 煮沸5分钟。

<SDS-PAGE>
样品电泳量:10 μL
<检测方法>
银染法
配制可过量表达DYKDDDDK标签融合蛋白(约19 kDa)的大肠杆菌裂解液,分别用本产品和A公司产品免疫沉淀后,用DYKDDDDK肽进行抗原洗脱。将得到的抗原样品用SDS-PAGE分离、银染色后,比较抗原回收率。

产品名称

子类
  克隆号

规格

产品编号

包装

DYK标签:DYKDDDK

抗DYKDDDDK标签抗体琼脂糖珠

Anti DYKDDDDK tag 

Antibody Beads

小鼠IgG2b

1E6

免疫化学用

012-22781

2 mL(Net 1 mL)

018-22783

10 mL(Net 5 mL)

016-22784

50 mL(Net 25 mL)

 识别N端、C端、Internal的DYKDDDDK标签
 使用载体:4%琼脂糖
 溶液组成:1×PBS (pH 7.4), 50 w/v% glycerol, 0.02 w/v%   sodium azide
 抗体结合量:7.5 mg/mL
 结合容量:1mL本产品可结合约1.0 mg的DYKDDDDK标签融合蛋白。

His标签:HHHHHH(6×Histidine)

抗6×组氨酸抗体琼脂糖珠

Anti 6×Histidine Antibody Beads

小鼠IgG3・κ
  28-75

免疫化学用

019-23391

2 mL(Net 1 mL)

015-23393

10 mL(Net 5 mL)

 可识别N端、C端的6×His tag
 使用载体:4%琼脂糖
 溶液组成:1×TBS (pH 7.4), 0.05 w/v% sodium azide
 抗体结合量:2.0 mg/mL
 结合容量:1 mL本产品可结合约1.0~2.0 mg的6×His标签融合蛋白

HA tag:YPYDVPDYA

抗HA抗体琼脂糖珠

Anti HA Antibody Beads

小鼠IgG1  

4B2

免疫化学用

014-23081

2 mL(Net 1 mL)

010-23083

10 mL(Net 5 mL)

 使用载体:4% 琼脂糖
 溶液组成:1×PBS (pH 7.4), 50% glycerol, 0.02 w/v% sodium azide
 抗体结合量:8.5 mg/mL
 结合容量:1 mL本品可结合约1.5 mg的HA标签融合蛋白

c-My标签:EQKLISEEDL

抗c-Myc抗体琼脂糖

Anti c-Myc Antibody Beads (10D11)

小鼠IgG1

10D11

免疫化学用

010-26501

200 μL

(Net 100 μL)

016-26503

2 mL(Net 1 mL)

014-26504

10 mL(Net 5 mL)

 使用担体:4% 琼脂糖
 溶液组成:1×PBS (pH 7.4), 50% glycerol, 0.02w/v% sodium azide
 抗体结合量:7.5mg/mL
 结合容量:1mL本产品可结合约0.9 mg的c-Myc tag融合蛋白

V5 tag:GKPIPNPLLGLDST

抗V5 tag抗体琼脂糖

Anti V5 tag Antibody Beads

小鼠IgG1
  10B5

免疫化学用

016-24381

2 mL(Net 1mL)

012-24383

10 mL(Net 5mL)

 使用载体:4%琼脂糖
 溶液组成:1×PBS (pH 7.4), 50% glycerol, 0.02w/v% sodium azide
 抗体结合量:7 mg/mL
 结合容量:1 mL本产品可结合约0.5 mg的V5标签融合蛋白

 

◆相关产品


内参照

下表为Western Blot实验中参照用单抗一览表。


产品名称

规格

产品编号

包装

抗β肌动蛋白单抗
  Anti β-Actin, Monoclonal Antibody

免疫化学用

013-24553

200 μg

011-24554

1 mg

017-24556

5 mg

抗β肌动蛋白单抗,过氧化物酶标记

Anti β-Actin, Monoclonal Antibody,   Peroxidase Conjugated

免疫化学用

017-24573

200 μL

抗α-微管蛋白, 单抗

Anti α-Tubulin, Monoclonal Antibody

免疫化学用

011-25034

10 μg

017-25031

200 μg

013-25033

1 mg

Anti β-Tubulin, Monoclonal Antibody
  抗β-微管蛋白, 单抗

免疫化学用

018-25044

10 μg

014-25041

200 μg

010-25043

1 mg

Anti GAPDH, Monoclonal Antibody
  抗GAPDH, 单抗

免疫化学用

016-25523

200 μg

014-25524

1 mg

010-25526

5 mg

Anti GAPDH, Monoclonal Antibody, Peroxidase   Conjugated
  抗GAPDH, 单抗, 过氧化酶结合

免疫化学用

015-25473

200 μL

 


蛋白酶抑制剂系列


产品名称

规格

产品编号

包装

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 I,无动物源成分(通用型)

Protease Inhibitor Cocktail Set I, Animal-derived-free (for general use) (×100), Lyophilized

通用型

165-26021

1 mL用

161-26023

1 mL用×5

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒III,   DMSO溶液(不含EDTA)(×100)
  Protease Inhibitor Cocktail Set III, DMSO Solution   (EDTA free) (×100)

动物细胞

163-26061

1 mL

169-26063

1 mL×5

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒V (无EDTA)(×100)
  Protease Inhibitor Cocktail Set V (EDTA free) (×100), Lyophilized

2D电泳

162-26031

1 mL

168-26033

1 mL×5

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 VI,DMSO溶液,用于植物(×100)
  Protease Inhibitor Cocktail Set VI, DMSO Solution (for Plant) (×100)

植物细胞

164-26091

1 mL

160-26093

1 mL×5

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒VII,DMSO溶液,组氨酸标签蛋白(×100)
  Protease Inhibitor Cocktail Set VII, DMSO Solution   (for Histidine-tagged Protein) (×100)

His Tag 纯化

167-26101

1 mL

163-26103

1 mL×5

亲和标签比较表

亲和标签

TARGET

PA

6xHis

氨基酸序列

(YPGQ)5V

GVAMPGAEDDVV

HHHHHH

残基数

21

12

6

分子量 (kDa)

2.34

1.16

0.84

等电点(pI)

5.52

3.49

7.21

配体

TARGET tag

PA tag

Ni, Co, Zn, Cu

亲和珠回收

40% Propyleneglycol,
  1×TBS(pH7.5)

3M MgCl2, MES(pH6.0)

0.5M Imididazole(pH7.4)

单抗边界强度

(KD(M))

1.0×10-8

4.9×10-10

Ni-NTA:
  1.0×10-5~-6

单抗

Clone No.

P20.1(Mouse)

NZ-1(Rat)

Merck:HIS. H8(Mouse)

亲和力

++++

+++++

+++

提纯成本

+

+

+

多肽洗脱

+++

+++

Imidazole

背景

(培养上清)

+

+

+++++

背景

(细胞裂解物)

+

+

++++

亲和标签

DYKDDDDK

c-Myc

HA

GST

氨基酸序列

DYKDDDDK

EQKLISEEDL

YPYDVPDYA

残基数

8

10

9

218

分子量 (kDa)

1.01

1.20

1.10

26

等电点(pI)

3.97

4.00

3.56

配体

DYKDDDDK tag

c-Myc tag

HA tag

GST

亲和珠回收

Tris-HCl,
  Glycine Buffer(pH2~3.5)

Tris-HCl,
  Glycine Buffer(pH2~3.5)

Tris-HCl,
  Glycine Buffer(pH2~3.5)

Glutathione,
  Tris-HCl,
  Glycine Buffer(pH2~3.5)

单抗边界强度

(KD(M))

2.8×10-8

2.2×10-9

2.8×10-9

Glutathione:
  1.0×10-5~-6

单抗

Clone No.

M2(Mouse)

9E10(Mouse)

3F10(Mouse)
  HA-7(Rat)

Wako:5A7(Mouse)

亲和力

++++

++++

++++

++++

提纯成本

++

++

++

+

多肽洗脱

+++

++

++

Glutathione

背景

(培养上清)

++++

+++

+++

++++

背景

(细胞裂解物)

++++

++++

+++

++++

  本比较表为Wako独家调查的数据。样品、检测方法和手法的不同,特异性也会有所变化,因此无法保证各个亲和标签的功能。

 

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