Phos-tag™ 凝胶荧光染料

 

Phos-tag™ 凝胶荧光染料，是一种可在生理pH范围内，对凝胶中的磷酸化蛋白进行染色的荧光染料。进行了SDS-PAGE，用本产品处理聚丙烯酰胺凝胶，可以对磷酸化蛋白进行特异性染色。

本系列有波长不同的Yellow（黄）、Magenta（品红）、Cyan（蓝绿）、Aqua（浅绿）四种颜色。每管规格为0.2 mg，可对约20个迷你凝胶进行染色。

 

购买前请注意：

使用Phos-tag^™ 凝胶荧光染料，需要用到Mixed reagents for Phos-tag™ Common Solution 5×（产品编号：383-15231）。请一同购买。

◆特点

●　高灵敏度

●　在生理pH下即可染色

●　选择性与pSer、 pTyr、 pHis以及pAsp残基结合

●　无需放射性物质、化学物质标签、抗体

●　2小时内完成染色

◆产品对比

其他公司产品A ●　凝胶pH：2~4 ●　5个步骤（固定、清洗、染色、脱色、清洗） ●　所需时间：≧5小时 ●　溶液更换次数：11次 ●　卵清蛋白检测上限：～5 ng/lane

Phos-tag™ Magenda（品红） ●　凝胶pH：7~8（不进行脱磷酸化） ●　3个步骤（固定、染色、清洗） ●　所需时间：≦2小时 ●　溶液更换次数：4次 ●　卵清蛋白检测上限：～1 ng/lane

◆应用实例①

磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白的染色Phos-tag™ Aqua（浅绿）

Lane.No.（）内为磷酸基团数目

1. Marker 2.α-酪蛋白（9P） 3.经ALP处理的α-酪蛋白 4.β-酪蛋白（5P） 5.经ALP处理的β-酪蛋白 6.卵清蛋白（2P）

7.经ALP处理的卵清蛋白 8.胃蛋白酶（1P） 9.经ALP处理的胃蛋白酶 10.β-半乳糖苷酶 11.牛血清白蛋白 12.碳酸酐酶

Phos-tag™ Aqua（浅绿）染料选择性：用Phos-tag™ Aqua（浅绿）对10％（w/v）的PAGE胶进行染色，其中分别含有四组完整的以及经ALP（碱性磷酸酶）处理的磷酸蛋白（α-酪蛋白，β-酪蛋白，卵清蛋白和胃蛋白酶各1 μg）（左），然后使用考马斯亮蓝CBB G-250染色（右）。

成功特异性地检测出SDS-PAGE后的磷酸化蛋白。

数据提供：广岛大学研究生院 医学系科学研究科 医药分子机能科学研究室 木下惠美子老师、木下英司老师、小池透老师

 

◆应用实例②

使用Phos-tag™ 荧光凝胶染料的组氨酸、天门冬氨酸的磷酸化分析

细菌通过将信息从组氨酸激酶EnvZ传递到应答调控子OmpR来调节基因的表达。分别分析有自磷酸化能力的EnvZ激酶和被EnvZ催化的OmpR中组氨酸和天门冬氨酸的磷酸化。

可以确认Phos-tag™ Magenta（品红）和Phos-tag™ SDS-PAGE 这两种试剂中的His和Asp的磷酸化随激酶的处理时间经过不断增强。尤其是使用Phos-tag™ Magenta（品红）时，可以仅检测出His磷酸化或Asp磷酸化。

数据提供：广岛大学研究生院 医学系科学研究科 医药分子机能科学研究室 木下惠美子老师、木下英司老师、小池透老师

 

◆应用实例③

用于筛选组氨酸激酶抑制剂（新型抗生素）

使用Phos-tag™荧光凝胶染料，筛选组氨酸激酶抑制剂。

证实磷酸化依赖组氨酸激酶抑制剂浓度被抑制。

数据提供：广岛大学研究生院 医学系科学研究科 医药分子机能科学研究室 木下惠美子老师、木下英司老师、小池透老师

参考文献

“Quantitativemonitoring of His and Asp phosphorylation in a bacterial signaling system byusing Phos-tag Magenta/Cyan fluorescent dyes”, Emiko Kinoshita-Kikuta, HiroshiKusamoto, Syogo Ono, Keisuke Akayama, Yoko Eguchi, Masayuki Igarashi, ToshihideOkajima, Ryutaro Utsumi, Eiji Kinoshita, Tohru Koike, Electrophoresis, 2019

◆使用方法

※调整平衡及清洗溶液以及染色溶液必须使用Mixed reagents for Phos-tag™ Common Solution 5× (产品编号：383-15231)。

◆激发波长/荧光波长

Phos-tag™ Yellow（黄）	Phos-tag™ Magenta（品红）
Ex/Em=505 nm/514 nm	Ex/Em=547 nm/561 nm
Phos-tag™ Cyan（蓝绿）	Phos-tag™ Aqua（浅绿）
Ex/Em=643 nm/661nm	Ex/Em=551 nm/564 nm

◆产品列表

产品编号	产品名称	规格
380-15241	Phos-tag™ Yellow Phos-tag™ 黄色荧光染料	0.2 mg
386-15221	Phos-tag™ Magenta Phos-tag™ 品红荧光染料	0.2 mg
382-15201	Phos-tag™ Aqua Phos-tag™ 浅绿荧光染料	0.2 mg
389-15211	Phos-tag™ Cyan Phos-tag™ 蓝绿荧光染料	0.2 mg
383-15231	Mixed reagents for Phos-tag™ Common Solution 5× Phos-tag™ 5×染色通用混合溶液	1 EA

◆相关产品

Phos-tag™ Acrylamide

产品编号	产品名称	规格
304-93521	Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 Phos-tag™ 丙烯酰胺	10 mg
300-93523		2 mg
304-93526	Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5 mM Aqueous Solution Phos-tag™ 丙烯酰胺5 mM水溶液	0.3 mL

SuperSep™ Phos-tag™

用于Bio-Rad伯乐电泳仪

货号	品名	电泳仪	规格
198-17981	SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 7.5%, 17 well, 83×100×3.9mm	Mini-PROTEAN®  Tetra Cell (Bio-Rad Laboratories, Inc.)	5 块
195-17991	SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well, 83×100×3.9 mm		5 块

用于Life Technologies伯乐电泳仪

货号	品名	电泳仪	规格
192-18001	SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 7.5%, 17 well, 100×100×6.6 mm	XCell SureLock®  Mini-Cell (Life Technologies, Inc.)	5 块
199-18011	SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well, 100×100×6.6 mm		5 块

Phos-tag™ Biotin

产品编号	产品名称	规格
301-93531	Phos-tag™ Biotin BTL-104 Phos-tag™ 生物素	10 mg
308-97201	Phos-tag™ Biotin BTL-111 1 mM Aqueous Solution Phos-tag™ 生物素1 mM水溶液	0.1 mL

Phos-tag™ Agarose

产品编号	产品名称	规格
302-93561	Phos-tag™ Agarose Phos-tag™ 琼脂糖	0.5 mL
308-93563		3 mL

Phos-tag™ Tip

产品编号	产品名称	规格
387-07321-8P	Phos-tag™ Tip Phos-tag™ 琼脂糖枪头	8 pcs
387-07321		8 pcs×10

Phos-tag™ Mass Analytical Kit

产品编号	产品名称	规格
305-93551	Phos-tag™ Mass Analytical Kit     Phos-tag™ 质谱分析试剂盒	1 set