重组胰蛋白酶(RTrypsin)


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重组胰蛋白酶(RTrypsin)

重组胰蛋白酶(RTrypsin)

重组胰蛋白酶(RTrypsin)

◆概述


胰蛋白酶(Trypsin; EC 3.4.21.4)是一种丝氨酸蛋白酶,酶解赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组猪胰蛋白酶是由毕赤酵母重组表达并采用层析色谱法纯化获得。氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致,分子量为24 kDa,最适pH为7.0-9.0。可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中,如:重组胰岛素生产;细胞培养、细胞发酵;蛋白质的酶解、测序;各种组织的细胞分离等。活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如TLCK、PMSF等的抑制,金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。

 


◆优势


● 批量生产规模大,批间小

● 高纯度,高比活性

● 重组表达生产,无外源性病毒污染,生产过程不使用动物来源原料

 


◆纯度


SDS-PAGE显示纯度>95%。

 


◆来源


重组毕赤酵母菌株,其克隆有来自猪的胰腺来源阳离子型胰蛋白酶基因。

 

◆使用方法


保存:10 mmol/L HCl,20 mmol/L CaCl2;溶解后分装-15 ℃以下保存。

酶切体系:25 mmol/L Tris-HCl , pH 7.6~8.0。

推荐使用量:蛋白酶:融合蛋白质量比1:20~1:100(肽图或蛋白组学研究),1:200~1:2000(多肽/蛋白生产工艺)。

 

◆保存条件


储存稳定性:冻干粉存于-15 ℃以下,24个月稳定;10 mmol/L HCl,20 mmol/L CaCl2溶解后分装储存于-15 ℃以下,反复冻融5次,未能观察到活性损失;溶解后2~8 ℃保存建议不超过7 d。

运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定

 

◆应用实例

 

RTrypsin特异性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKR、LWK、YGK、R、RLWK,蛋白酶:合成多肽质量比1:100,37 ℃酶切反应10 min,LC-MS验证酶切反应特异性。

重组胰蛋白酶(RTrypsin)

Peak#

R.T.

M.W.

Sequence

Peak 1

6.70 min

366.42

YGK

Peak 2

7.61 min

552.6

YGKR

Peak 3

17.67 min

445.56

LWK

Peak 4

19.53 min

601.75

RLWK

Peak 5

19.97 min

950.15

YGKRLWK

◆产品信息


产品编号

产品名称

规格

比活

RTP0102

RTrypsin

10 mg

3800 USP/mg

RTP0103

RTrypsin

1 mg

3800 USP/mg

RTP0104

RTrypsin

10 μg

3800 USP/mg



◆相关产品


产品编号

产品名称

规格

储存温度

其他信息

MDRK0101 

RTrypsin  ELISA Kit
重组胰蛋白酶检测试剂盒

96 孔

2~8 ℃

检测范围
4.0~250 ng/mL

IRTP0101 

immobilized Recombinant Trypsin
固定化重组胰蛋白酶

1.0 mL

-15 ℃以下

1.0 mL含1.0 mg

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