重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)


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重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)

重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)



◆概述


Kex-2(E.C.3.4.21.61)属于枯草杆菌蛋白酶家族,为酵母自身编码的一种前体加工酶,Ca2+ 依赖型丝氨酸蛋白酶,能够专一性地识别和切割Lys-Arg,Arg-Arg,Pro-Arg等双碱性氨基酸 的羧基端肽键。不同于Trypsin,该酶不能识别和切割单一碱性氨基酸(Arg或Lys)的羧基端肽键。常在酵母表达外源蛋白前体中加入Kex-2识别位点,便于外源蛋白前体加工。该酶最适pH为9.0,在偏酸性环境中稳定,稳定pH为5.0-6.0。最适温度为37 ℃,酶活性不受常规丝氨酸蛋白酶抑制剂(如PMSF、TPCK等)抑制。

 

※碱性氨基酸:水解生成的氢氧根负离子多于氢正离子的氨基酸,其特点是侧链常含有可质子化的碱性化学基团。包括以下三种:

中文名

英文名

缩写

符号

等电点

精氨酸

Arginine

Arg

R

10.76

赖氨酸

Lysine

Lys

K

9.74

组氨酸

Histidine

His

H

7.59

◆优势


● 单批次产量大,批间差小

● 高纯度,高比活性

● 无外源性病毒污染,无动物源生产原料

 


◆纯度


SDS-PAGE显示纯度>90%。

 


◆使用方法


溶解缓冲:20 mmol/L NaAc-HAc,2 mmol/L Ca2+,pH 5.0~5.5。

酶切体系:50~100 mmol/L Tris,2 mmol/L Ca2+,pH 7.0~9.0;或HEPES,5 mmol/L  Ca2+,pH 7.0~9.0;

推荐使用量:蛋白酶:融合蛋白质量比1:20~1:1000



◆保存条件


储存稳定性:冻干粉存于-15 ℃以下,24个月稳定;20 mmol/L NaAc-HAc,2 mmol/L Ca2+

储存稳定性:pH 5.0~5.5溶解后分装储存于-15 ℃以下,避免反复冻融;溶解后2~8 ℃保存建议不超过24 h。

运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定。



◆应用实例


RKex-2特异性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKR及LWK,蛋白酶:合成多肽质量比1:1000,37 ℃酶切反应10 min,LC-MS验证酶切反应特异性。

重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)

Peak#

R.T.

M.W.

Sequence

Peak 1

2.79 min

522.6

YGKR

Peak 2

6.26 min

445.56

LWK

Peak 3

6.94 min

950.15

YGKRLWK

◆产品信息


产品编号

产品名称

规格

比活

RKex20202

RKex2

10 mg

10 U/mg

RKex20204

RKex2

10 μg

10 U/mg

◆相关产品

产品编号

产品名称

规格

储存温度

检测范围

MDRK0201

RKex2 ELISA Kit
重组双碱性内肽酶检测试剂盒

96 孔

2~8 ℃

1.0~4000 ng/mL

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