人来源细胞冻存液

iStock

◆比较本公司目前使用的含血清冻存液与iStock的性能

从 9 名知情同意的健康者血液中，分离出外周血单核细胞（PBMC），并使用OKT3抗体固相培养瓶和本公司的淋巴细胞培养基培养4天。使用含血清冻存液和iStock，将增殖的细胞制备成1.5×10⁷ cells/mL，采用慢速冷冻法，冷冻于-80℃。第二天，转移至液氮罐中，保存7天后解冻，比较回收率（解冻后细胞数/冷冻前细胞数×100%）。

◆iStock使用方法

◆规格

适用细胞：◯人免疫细胞     ◯人间充质干细胞      ◯人iPS细胞     

保存条件：冷藏、避光、2-10℃

无菌检查：◯内毒素：显色法    ◯支原体：培养法    ◯真菌、细菌：琼脂平板表面涂抹法

操作步骤：

1. 细胞冻存   

❶将细胞移至离心管。

❷离心分离（800×g左右，3-5 min），用抽吸器去除上清。向~1.5×107个细胞中加入1 mL的 iStock，缓慢地进行移液。

❸将细胞悬液分注至冷冻管中。

❹在-80℃的低温冷冻箱进行冻存（根据细胞类型，将冷冻管转移至市售的冷冻容器进行冻存）。

❺第二天移至液氮罐中。

2. 细胞解冻    

❶在37°C的温水浴中解冻冷冻管。

❷立即与约10 mL的培养液混合。

❸离心分离（800×g左右，3-5 min），用抽吸器去除上清。

❹在适量的培养液中悬浮，转移至培养容器，开始培养。

注意事项：

◯请勿用于人体。

◯本产品未获得医药用品的相关许可证明。

◯在使用前，先对使用的细胞进行确认测试。

◯对于因本产品的使用问题造成的任何事故或损坏，本公司概不负责。

◯使用上如有疑问，请联系（株）LYMPHOTEC。

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