即用型

脑组织冻存液

本品是冷冻保存大鼠或小鼠胚胎脑组织用的冻存液。

只要将脑组织放入解冻后的本品中即可实现冻存。

冻存的脑组织在解冻后可通过神经细胞分散溶液（产品编号：291-78001，297-78101）和神经细胞培养基（产品编号：148-09671）进行分散和培养。

◆特点

●　能冻存解剖后的大鼠或小鼠的脑组织。

●　随时可用

◆冻存数据：大鼠海马体（胎生19日）

		总细胞数（cells/vial）	活细胞数（cells/vial）	活细胞比例（%）	活细胞数比 （假设未经过冻存的活细胞数为1）
①	未经冻保	1.74×106	1.65×106	95	1
②	脑组织冻存液（本品）	1.21×106	1.11×106	92	0.67
③	本公司的冻存液 （通用动物细胞用） （含有血清成分）	8.34×105	7.29×105	87	0.44
④	其他公司的冻存液 （通用动物细胞用） （含有血清成分）	3.40×105	2.91×105	86	0.18

与其他公司的产品相比，在使用本品保存的脑组织中，能获得多3倍以上的活细胞。

注意事项

请尽量缩短从开始解剖到一次冷冻开始的时间。（请以从进行动物麻醉到将脑组织放入冷冻保存溶液中的时间控制在1小时之内为标准。）从胚胎中取出的细胞存活率随时间的推移而下降。使用神经细胞分散液能去除死亡细胞，减少得到的细胞总数。冰上操作。

◆实验方案例子

解剖

1.　麻醉小鼠或大鼠。

2.　用70%乙醇对麻醉动物进行全身（包括胡须和尾巴）消毒。

3.　用不锈钢盘将动物送入铺好无尘纸的清洁区。

4.　从妊娠动物中取出胚胎，放入含有L-15溶液的培养皿中。预先将培养皿与L-15溶液的温度调节到4℃。

4.　将盛放胚胎的培养皿至于冰块上。

4.　※L-15溶液：含有终浓度为0.05 mg/mL硫酸庆大霉素的Leibovitz's L-15培养基

5.　将胚胎转移到培养皿的盖子上，并使用显微镜快速移除脑组织。

6.　解剖后的脑组织放入另一个装有L-15溶液的培养皿，再将培养皿放置到冰块上。

 

一次冷冻

1.　将从冰箱中取出本品和冷冻用碎冰盒放到清洁区附近。

2.　用镊子把冷冻的脑组织放入本品中，盖好试管盖（放入脑组织前要充分混合保存溶液）。

3.　将试管埋入冷冻用碎冰盒中，试管与冰块要紧密接触（试管要埋入试管盖刚好露出冰面的位置）。

4.　盖上泡沫箱，静置90分钟。

 

二次冷冻

1.　一次冷冻后，将装有组织的试管转移至防冻套管，然后立刻放入超低温冰箱（-80℃）。

1.　（防冻套管要直接放置到冰箱内的底面。）

1.　※为了将装有组织的试管的温度变化控制在最小范围，操作时动作要快速。

1.　※进行这一步操作时，需注意样品管盖切勿与保存溶液相接触。

2.　在超低温冰箱（-80℃）中静置3小时。（静置时间可延长30分钟左右。但不能少于3小时。）

2.　※期间避免反复开关冰箱门。

 

保存

1.　二次冷冻后，将装有组织的样品管置于冻存架上，然后立刻放入液氮罐中。

1.　※进行这一步操作时，需注意样品管盖切勿与管内的保存溶液相接触。

◆产品列表

产品编号	产品名称	规格	包装
029-19161	Brain Tissue Freezing Medium 脑组织冻存液	细胞培养用	1 mL×10

◆相关产品

培养基

产品编号	产品名称	规格	包装
148-09671	Neuron Culture Medium 神经细胞用培养基	细胞培养用	100 mL

神经细胞用分散液

产品编号	产品名称	规格	包装
291-78001	Neuron Dissociation Solutions 神经细胞用分散液	细胞培养用	4 set
297-78101	Neuron Dissociation Solutions S 神经细胞用分散液S	细胞培养用	10 set

已知组成培养基/补充剂

产品编号	产品名称	规格	包装
148-09615	NS Basal Medium NS基础培养基	细胞培养用	500 mL
146-09351	NS Supplement(×50)	细胞培养用	10 mL
149-09721	NS Supplement without Insulin(×50) NS 添加剂（不含胰岛素）（×50）	细胞培养用	10 mL
145-09723			50 mL
142-09691	NS Supplement without Vitamin A(×50) NS 添加剂（不含维生素A）（×50）	细胞培养用	10 mL
141-09041	N2 Supplement with Transferrin(Apo)(×100) N2神经细胞生长添加剂含转铁蛋白（Apo）（×100）	细胞培养用	5 mL
141-08941	N2 Supplement with Transferrin(Holo)(×100) N2神经细胞生长添加剂含转铁蛋白（Holo）（×100）	细胞培养用	5 mL
073-05391	200 mmol/L L-Glutamine Solution (×100) 200 mmol/L 谷氨酸溶液（×100）	细胞培养用	100 mL