测序级重组赖氨酰内肽酶/胰蛋白酶预混装-wko富士胶片和光纯药Wako

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    测序级重组赖氨酰内肽酶/胰蛋白酶预混装-价格-厂家-供应商-wko富士胶片和光测序级重组赖氨酰内肽酶/胰蛋白酶预混装

     

    ◆概述

    本品选用A. Lyticus 来源氨基酸序列,利用独特大肠杆菌重组表达技术制备的Lys-C,能够特异性识别并酶切肽链中Lys 羧基端肽键;其与重组表达并经甲基化修饰的测序级胰蛋白酶,经研究和方法验证,按照特定比例混合后,能够在一次酶切或分步酶切中,保证特异性的前提下,酶切效率更高,便于进行序列分析。

     

    ◆优势

    1)采用甲基化修饰重组表达胰蛋白酶,其赖氨酸残基经甲基化修饰有效防止酶切缓冲中胰酶自切或被Lys-C 降解造成胰酶活性的降低。

    2)独有的Lys-C 重组表达制备技术,保证高纯度与高酶活性的同时,无任何杂酶活性,确保酶切反应的特异性。

     

    ◆纯度·来源

    选用A. Lyticus 来源氨基酸序列,利用独特大肠杆菌重组表达技术制备的Lys-C

    选用猪的胰腺来源阳离子型胰蛋白酶基因,利用毕赤酵母菌株重组表达技术制备的胰蛋白酶

     

    ◆使用方法

    溶解缓冲:用无菌水或者50mmol/L Tris-HCl,pH 8.0~8.5;溶解后分装,-15℃以下保存。

    酶切缓冲:50mmol/L Tris-HCl,pH 8.0~8.5

    推荐条件:蛋白酶:融合蛋白质量比1:25~1:100(蛋白组学或肽图)37℃反应。

    针对疏水性强、溶解性较差的蛋白,可添加变性剂或者封闭二硫键(烷基化)使其空间结构被打开,从而提高酶切效率或者提高肽图覆盖率。

     

    可以参考以下方法:

    两步溶出法消化:可以添加终浓度为5mmol/L的DTT 在室温反应30min ; 再加入终浓度为10mmol/L 的碘乙·酰胺,在室温避光反应30min。蛋白溶液中补入终浓度6~8mol/L 尿素,胰蛋白酶/Lys-C 与蛋白质或蛋白质混合物以1:25 的蛋白质∶蛋白酶比(w/w)混合并在37℃下孵育3~4h,用酶切缓冲稀释尿酸降至1mol/L 以下,在37℃反应过夜。

    终止反应:加入终浓度0.5-1%三氟乙·酸,14000-16000×g,离心10min 去除沉淀颗粒。

     

    ◆保存条件

    储存稳定性:冻干粉存于-15℃以下,24 个月稳定;50mmol/L Tris-HCl pH 8.0~8.5 溶解后储存于-15℃以下,反复冻融5 次,无活性损失。

    运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定。

     

    ◆应用实例

    测序级重组赖氨酰内肽酶/胰蛋白酶预混装-价格-厂家-供应商-wko富士胶片和光

    Lys-C/Trypsin Mix 与Trypsin 特异性酶切抗体对比图

     

    蛋白酶:单抗质量比1:25,37℃酶切反应过夜。

    (更多范畴应用实例,请与我们联系)

     

    ◆产品列表

    产品编号

    产品名称

    规格

    RME0101

    RLys-C/MTP Mix
        重组赖氨酰肽链内肽酶/重组胰蛋白酶混合装

    20 μg/支

    RME0102

    20 μg/支,5 支

     

    ◆相关产品

    产品编号

    产品名称

    规格

    RLYS-C0401

    RLys-C
        重组赖氨酰内肽酶

    20 μg

    RLYS-C0403

    1 mg

     

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