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Bst DNA Polymerase
链置换酶
◆产品说明
本产品具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性，是一款自动从模板双链DNA的氢键解离，然后后合成新DNA链的酶。由于其特性，耐热性链置换DNA聚合酶无需DNA的双链解离，即可在恒定温度下合成DNA，且合成不受DNA二级结构的抑制。
特点
● 具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性
● 可在恒定温度下合成DNA
● 适用于合成GC含量高的DNA链
● 合成不受DNA二级结构抑制
应用
● 利用链置换活性的应用（等温基因扩增法等）
Bst DNA Polymerase
最佳反应温度
60°C～65°C
失活时间*1
80°C、5 min
*1 将酶原液直接热变性时的失活温度
来源
Geobacillus stearothermophilus
活性
8 units/μL
单位定义
1 unit指以小牛胸腺DNA为引物/模板，在65°C，30 min的条件下将10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物的酶量。
储存液成分
10 mmol/L Tris-HCl（pH 7.5）, 1 mmol/L DTT, 0.1% Tween 20, 0.1 mmol/L EDTA, 50% Glycerol
酶反应条件
随酶附带10×的酶反应专用缓冲液（0.5 mL×1）。如反应总体积为50 μL，添加5 μL的酶反应专用缓冲液
◆产品组成
Bst DNA Polymerase（1,600 units）
产品组分
容量
保存
Bst DNA Polymerase（8 units/μL）
200 μL × 1
-20°C
10 × Bst Reaction Buffer（80 mmol/L Mg2+）
500 μL × 1
-20°C
◆应用实例
实验案例1 LAMP法中的运用
LAMP法 反应条件
3.0% Agarose 21
TAE凝胶电泳
EtBr染色
M：Gene Ladder Wide 1
1：A 公司Bst DNA Polymerase
2：本公司Bst DNA Polymerase
Candidatus Liberibacter asiaticus DNA
1 × 106 copies
FIP*
40 pmol
BIP*
40 pmol
F3 Primer*
5 pmol
B3 Primer*
5 pmol
Loop Primer F*
20 pmol
Loop Primer B*
20 pmol
dNTPs Mixture
1.4 mM each
10 × Bst Reaction Buffer
2.5 μL
Bst DNA Polymerase
8 units
Total
25 μL
反应
65°C
60 min
*引物序列
FIP: 5′-GCATGCCGAGGATCAATGCCTTGCTTAAAGAGCGTGCTACG-3′
BIP: 5′-TATGCCTAATGGCACGGGGGTAAGCTTCATCCGCCTTCGA-3′
F3 Primer: 5′-TGGGTTAAGTGATGCTGTGG-3′
B3 Primer: 5′-CAACAATATCAGCCCCTGCT-3′
Loop Primer F: 5′-TCTCAACTGTTTCATCAAACCTAGC-3′
Loop Primer B: 5′- CGTGGCGGTTTTTGCTACA-3′
实验案例2 RCA法评估Bst DNA Polymerase的耐热性与最佳反应温度
RCA法 反应溶液组成
M13mp18 single strand DNA
40 ng
Universal primer
50 mM
dNTPs Mixture
1.4 mM each
Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C)
20 mM
KCl
10 mM
(NH4)2SO4
10 mM
MgSO4
8 mM
Tween 20
0.10%
Betaine
0.8 M
Bst DNA Polymerase
4 units
Total
20 μL
反应条件
各个温度下
30 min
结果
条带
M： Gene Ladder Wide 1 (产品编号313-06961)
D： 模板 DNA (M13mp8 single strand, 产品编号319-00841)
引物序列（Universal Primer）
5′-GTTTTCCCAGTCACGACGTTGTA-3′
电泳条件
0.7% Agarose S / TAE凝胶电泳
EtBr染色
使用不含SDS的Loading Buffer
备注
本实验为比较两种Bst DNA Polymerase，使用相同的反应液组成进行反应。在RCA法中使用各种酶配套的专用缓冲液时，须进行预实验探究反应体系。
◆相关信息
备注
● 本产品为实验研究用试剂。不可作为医药品使用。
● 检测Candidatus Liberibacter asiaticus的LAMP引物组合是国立研究开发法人 农业、食品产业技术综合研究机构 九州冲绳农业研究中心灵活运用先进技术，在农林水产研究高度化事业“抑制顽固性疾病柑橘绿化病传播的技术开发”中开发的产品。
License
● LAMP（Loop-mediated Isothermal Amplification）法由荣研化学株式会社持有专利权。
◆产品列表
产品编号
产品名称
包装
311-07481
Bst DNA Polymerase
1600 units
◆相关产品
产品编号
产品名称
包装
319-07281
Csa DNA Polymerase
1600 units
319-07301
96-7 DNA Polymerase
1600 units
312-07271
dNTPs Mixture（25 mM each）
400 μL
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